厚壳贻贝对高温和低氧胁迫的生理生化响应研究

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厚壳贻贝(Mytilus coruscus)主要分布于温带海域,包括我国东海、黄海、渤海,日本的北海道以及韩国济州岛等。在我国的浙江、福建东部沿海产量较大,是我国常见的水产经济物种之一,主要集中在浙江嵊泗县养殖。然而,随着厚壳贻贝养殖业的养殖规模不断扩大,与厚壳贻贝养殖技术相关的生理生态学基础研究相对滞后,影响了这个产业的发展。在厚壳贻贝养殖过程中,温度和溶解氧等是厚壳贻贝常见的两种环境胁迫因子,但目前关于厚壳贻贝对其生理生态学响应及机制的研究报道较少。本论文研究了厚壳贻贝对高温和低氧胁迫的生理生态学响应,并对相关的机理进行了探讨。本研究获得的主要结果如下:1高温和低氧对厚壳贻贝滤水率和摄食行为的影响研究了三个不同温度水平(20℃、25℃和30℃,其中20℃为温度对照组)对厚壳贻贝(壳长85.36±3.93 mm)滤水率和摄食行为的影响;五个不同溶氧(DO)水平(1、2、4、6、8±0.5 mg/L,温度为20℃,其中8 mg/L为常氧对照组)对厚壳贻贝滤水率和摄食行为的影响;30℃和1 mg/L双重胁迫下对厚壳贻贝进行持续监测,分别于0、6、12、24、48、96、144 h阶段测定其滤水率。主要结果如下:(1)30℃胁迫下的厚壳贻贝单位干重滤水率和个体滤水率下降,厚壳贻贝贝壳开口变小。(2)20℃、DO为1 mg/L胁迫下的厚壳贻贝单位干重滤水率和个体滤水率下降,厚壳贻贝贝壳开口接近闭合。(3)30℃、DO为1 mg/L双重胁迫下的厚壳贻贝单位干重滤水率和个体滤水率大体呈先升高后下降的趋势,且基本低于对照组(20℃常氧)。2高温和低氧对厚壳贻贝呼吸代谢的影响研究了三个不同温度水平(20℃、25℃和30℃,其中20℃为温度对照组)对厚壳贻贝(壳长85.36±3.93 mm)耗氧率和排氨率的影响;五个不同溶氧水平(1、2、4、6、8±0.5 mg/L,温度为20℃,其中8 mg/L为常氧对照组)对厚壳贻贝耗氧率和排氨率的影响;30℃和1 mg/L双重胁迫下对厚壳贻贝进行持续监测,分别于0、6、12、24、48、96、144 h阶段测定其耗氧率和排氨率。主要结果如下:(1)在20-30℃范围内,厚壳贻贝的耗氧率随温度升高而升高,排氨率呈先上升后下降的趋势。厚壳贻贝的耐受临界温度值可能在30-34℃内。(2)厚壳贻贝在DO为1 mg/L胁迫下的耗氧率下降,排氨率升高。(3)在30℃、DO为1 mg/L双重胁迫下,24 h内的厚壳贻贝呼吸排泄受到一定影响,随着双胁迫时间的延长可能有致死风险。3高温和低氧对厚壳贻贝相关酶活性的影响研究了三个不同温度水平(20℃、25℃和30℃,其中20℃为温度对照组)对厚壳贻贝(壳长85.36±3.93 mm)三种组织(外套膜、鳃和肝胰腺)呼吸代谢酶、非特异性免疫酶、抗氧化酶和消化酶活性的影响;五个不同溶氧水平(1、2、4、6、8±0.5mg/L,温度为20℃,其中8 mg/L为常氧对照组)对厚壳贻贝三种组织非特异性免疫酶、抗氧化酶、呼吸代谢酶和消化酶活性的影响;30℃和1 mg/L双重胁迫下对厚壳贻贝进行持续监测,分别于0、6、12、24、48、96、144 h阶段测定其非特异性免疫酶、抗氧化酶、呼吸代谢酶和消化酶的活性。主要结果如下:(1)30℃处理组厚壳贻贝鳃和肝胰腺AKP活性和外套膜ACP活性低于温度对照组,短期高温胁迫会抑制其参与免疫的水解酶的活性。1 mg/L处理组厚壳贻贝肝胰腺AKP和ACP活性低于常氧对照组,短期低氧胁迫会抑制厚壳贻贝水解系统非特异性免疫功能。(2)30℃处理组厚壳贻贝外套膜超氧化物歧化酶SOD活性显著高于温度对照组,鳃的SOD活性显著低于常氧对照组;短时间高温和低氧胁迫对厚壳贻贝三种组织过氧化氢酶CAT活性无显著影响。高温低氧双胁迫下厚壳贻贝的外套膜在抗氧化防御体系中发挥重要作用。(3)30℃处理组和1 mg/L处理组厚壳贻贝外套膜和肝胰腺的乳酸脱氢酶LDH活性升高,说明短时间高温和低氧胁迫导致厚壳贻贝发生无氧代谢。30℃处理组厚壳贻贝外套膜丙酮酸激酶PK活性显著升高,1 mg/L处理组厚壳贻贝外套膜己糖激酶HK和PK活性显著高于常氧对照组,说明短时间高温和低氧胁迫增强了糖酵解作用,以维持机体血糖水平,满足呼吸代谢的需要。厚壳贻贝的外套膜对高温低氧双胁迫反应更敏感,建议用作监测呼吸代谢酶变化的指标。(4)在20-30℃内,温度升高对厚壳贻贝肝胰腺的淀粉酶AMS和脂肪酶LPS活性无显著影响;高温限制厚壳贻贝肝胰腺对纤维素的消化能力,厚壳贻贝肝胰腺胃蛋白酶最适温度可能为25℃。短时间低氧降低了厚壳贻贝肝胰腺AMS、LPS和纤维素酶这三种消化酶活性,其消化能力可能依靠组织分泌的胃蛋白酶。高温低氧双胁迫下厚壳贻贝这四种消化酶的活性在24 h达到较高水平。(5)高温和低氧对厚壳贻贝非特异性免疫酶、抗氧化酶、呼吸代谢酶和消化酶的活性均具有组织特异性。
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