热激蛋白90是一种常见的分子伴侣，也是非应激状态下细胞中含量最丰富的蛋白之一，它广泛存在于细菌和真核生物细胞中，但古细菌细胞中不存在。真核生物细胞质HSP90对细胞各种条件下的生存都是必不可少的，而细菌的HSP90同系物HTPG只在应激状态下发挥作用。HSP90家族在体内多为二聚体，由三个功能结构域组成：N-末端能够结合ATP，C-末端能够促进二聚化并结合多种辅助伴侣分子，中间链接区具有ATPase活性且能够结合各种客户蛋白。单体的HSP90不具备生物活性功能。 虽然HSP90发现的比较早，但是对它的研究主要集中在动物中，而对植物中HSP90的功能方面的研究较少。拟南芥中HSP90有7个成员，其中AtHSP90-1、AtHSP90-2、AtHSP90-3和AtHSP90-4组成细胞质亚族，AtHSP90-5、AtHSP90-6、AtHSP90-7分别位于叶绿体、线粒体和内质网。最近研究表明HSP90分子伴侣复合物在植物发育和对外部刺激应答中非常重要，尤其是在抗性(resistance R)蛋白介导的抵抗病毒侵入的过程中起重要作用。 从番茄cDNA文库中克隆到的LeHSP84位于染色体中，全长2588bp，表达产物定位于细胞质中。序列分析证明LeHSP84是HSP90家族的一员。为了了解HSP84在植物抵抗逆境过程中的功能，本实验利用反义技术，抑制LeHSP84基因在番茄中的表达。结果表明，抑制LeHSP84基因表达后番茄的耐受热和盐胁迫的能力较对照并无明显差异。本论文主要结果如下： 1)转基因植株的获得：PCR和Southern blot结果显示转LeHSP84基因反义片段的番茄叶片DNA，用NPTII引物能扩增和杂交出特异DNA片段，而对照番茄未见特异条带，说明LeHSP84反义片段确实已导入番茄中。Northern blot结果显示转基因番茄常温下HSP84表达量要低于对照，说明反义技术已经抑制了LeHSP84基因在植物体内的表达。 2)番茄耐热性：将对照及转基因番茄植株分别置于40℃、42℃、44℃和46℃下热激处理2h，28℃恢复四周，观察发现40℃、42℃、44℃处理后很快植株就恢复，且转反义基因番茄生长状况与对照番茄并无明显差异。46℃处理后恢复较慢，三周后逐渐恢复，转反义基因番茄生长状况与对照番茄并无明显差异，转基因番茄株系的Fv/Fm下降程度略小于对照番茄植株，而叶绿素含量变化无明显差异。 3)番茄抗盐性：用200 mmol/L，的NaCl溶液对转基因植株和对照植株进行胁迫处理，植物生长均受到明显抑制，部分叶片变黄。但转反义基因番茄的生长情况与对照无明显差异。对盐处理后的转基因植株和对照植株相对含水量、Na+和K+离子含量、脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量、SOD酶活性的测定结果显示，转基因番茄的这些指标与对照植株基本没有差异，表明反义LeHSP84基因的导入没有明显影响番茄的抗盐性。