骨髓间充质干细胞对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

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目的观察早期注射骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响方法取幼龄大鼠(80-100g)胫骨和股骨,分离培养大鼠BMSCs。用可塑性石膏制备右下肢管型固定肌萎缩模型,根据随机数字分组法将24只大鼠分成假手术组,干细胞组,PBS组,干细胞组大鼠下肢制动48h后比目鱼肌局部多点注射1×106个BMSCs;PBS组大鼠下肢制动48h后注射等量磷酸缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS);假手术组大鼠下肢包裹相同重量石膏且不限制关节活动,48h后注射等量PBS,14天后各组大鼠拆除石膏取标本分析。结果培养中的大鼠骨髓间充质干细胞形态以梭形细胞为主,呈放射状排列的细胞集落,细胞生长旺盛,可连续稳定传代10代以上。实验中第4代骨髓间充质干细胞表面标志CD44,CD90均呈阳性表达,阳性率分别为95.84%,96.00%,而CD34,CD45阳性率极低,其阳性表达率分别为3.81%,4.25%。Western blot结果:与假手术组大鼠比目鱼肌中Bax和Bcl-2蛋白表达量[(0.14±0.11);(0.81±0.06)]比较,干细胞组和PBS组Bax蛋白表达量[(0.41±0.08);(0.63±0.10)]明显升高,而两组Bcl-2蛋白表达量[(0.47±0.14);(0.22±0.13)]明显降低;干细胞组中Bax蛋白的表达较PBS组降低明显,而Bcl-2蛋白的表达量显著增高,差异有明显统计学意义意义(P<0.05)。结论制动大鼠骨骼肌早期注射BMSCs,可引起抗凋亡蛋白Bcl-2上调、促凋亡蛋白Bax表达的下调。
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