【摘 要】
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酚氧化酶（phenoloxidase,PO）是无脊椎动物先天性免疫系统中的重要免疫相关酶。为了解仿刺参（Apostichopus japonicus）成参体腔细胞中酚氧化酶的生化与酶学特性,本研究以雌性和雄
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酚氧化酶（phenoloxidase,PO）是无脊椎动物先天性免疫系统中的重要免疫相关酶。为了解仿刺参（Apostichopus japonicus）成参体腔细胞中酚氧化酶的生化与酶学特性,本研究以雌性和雄性仿刺参成参的体腔细胞为样品,利用线性连续梯度非变性电泳结合邻苯二酚发色技术鉴定和分离了酚氧化酶,然后通过分光光度法测定了酚氧化酶的生化与酶学特性,并通过生长曲线测定法进行了仿刺参酚氧化酶氧化产物的抗菌特性分析。1.从仿刺参成参体腔细胞中鉴定出4种酚氧化酶（按非变性电泳迁移速率由慢到快分别命名为AjPO1、AjPO2、AjPO3、AjPO4）。2.AjPO4为雌性仿刺参成参体腔细胞所特有,并且在仿刺参幼参体腔细胞中未鉴定出上述4种酚氧化酶,表明仿刺参成参和幼参之间以及雌性和雄性成参之间在酚氧化酶系统的组成上均存在显著差异。3.4种酚氧化酶的最适pH分别为9、8、9和8。沸水浴处理20min后,AjPO1、AjPO2和AjPO3活力无显著变化,而AjPO4活力显著下降,表明AjPO1、AjPO2和AjPO3的耐热性强于AjPO4。4.4种酚氧化酶均可催化邻苯二酚、左旋多巴、多巴胺和对苯二酚,其中最适底物为邻苯二酚,但不能催化酪氨酸,表明4种酚氧化酶均属于漆酶型酚氧化酶。5.4种酚氧化酶的活力可被Mn2+和Fe2+激活,表明仿刺参成参酚氧化酶系统的功能发挥可能受到体内二价金属离子的调节。另外,4种酚氧化酶的活力还受到柠檬酸的抑制,表明4种酚氧化酶均为含铜的金属酶。
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