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铁皮石斛作为一种天然药食同源的食品,具有优良的保健作用,受到广大人们的关注。国内外有关铁皮石斛的化学成分和功效作用的文献、报道较多,但对铁皮石斛的抑菌作用研究较少。本研究以云南的铁皮石斛干品(铁皮枫斗)为原料,研究了同时蒸馏萃取法和索氏提取法提取铁皮石斛挥发性成分的工艺,对铁皮石斛同时蒸馏萃取法提取的挥发性成分和索氏提取法提取的粗提物进行了GC-MS成分分析,并进行了抑菌试验,旨在探讨和分析铁皮石斛挥发性成分的抑菌效果,为铁皮石斛的开发利用提供科学的依据和技术支撑。主要研究结果如下:1.铁皮石斛挥发性成分提取工艺研究选取同时蒸馏萃取法提取的铁皮石斛挥发性成分,以索氏提取法提取的铁皮石斛粗提物作为对照试验。两者均以水浴温度、料液比、提取时间为条件,进行单因素及L9(34)正交试验。试验结果表明,同时蒸馏萃取法提取铁皮石斛挥发性成分优化工艺条件为水浴温度50℃,料液比1:25g/mL,提取时间3.5h,铁皮石斛挥发性成分的提取率达到1.63%。各因素的影响顺序为:提取时间>料液比>水浴温度。索氏提取法提取铁皮石斛粗提物的优化工艺条件为水浴温度45℃,料液比1:45 g/mL,提取时间4h,提取铁皮石斛粗提物的提取率达到3.98%。各因素的影响顺序为:提取时间>水浴温度>料液比。2.铁皮石斛挥发性成分的GC-MS分析对同时蒸馏萃取法提取铁皮石斛挥发性成分和索氏提取法提取铁皮石斛粗提物进行GC-MS成分分析与鉴定。试验结果表明,在同时蒸馏萃取法提取的铁皮石斛挥发性成分中共鉴定出51个化合物,其主要成分包括:植物甾醇(21.79%)、2,6-二叔丁基对甲酚(10.13%)、豆甾醇(8.57%)、天然维生素E(8.38%)、丁香酚(6.46%)、生育酚乙酸酯(5.26%)、菜油甾醇(4.89%)、反-2-己烯醛(2.98%)、芳樟醇(1.95%)、松油醇(1.92%)、苯酚(0.32%)。索氏提取法中铁皮石斛粗提物鉴定出44个化合物。其主要成分为:邻苯二甲酸二丁酯(53.01%)、植物甾醇(20.20%)、2,6-二叔丁基对甲酚(13.09%)、甘菊蓝(2.41%)、丁香酚(1.21%)。分析了两种提取方法得到的铁皮石斛提取物的主要成分种类及其相对含量。3.铁皮石斛挥发性成分的抑菌效果及抑菌成分分析选取革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌,革兰氏阴性菌:大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和阪崎肠杆菌四种致病菌作为本试验的供试菌。采用滤纸片法,根据抑菌圈直径大小分别得出两种方法提取的铁皮石斛挥发性成分及粗提物对四种菌的抑制效果。试验结果表明,同时蒸馏萃取法提取的铁皮石斛挥发性成分和索氏提取法提取的铁皮石斛粗提物对四种供试菌的抑制作用大小顺序均为:金黄色葡萄球菌?阪崎肠杆菌?大肠埃希氏菌?鼠伤寒沙门氏菌。采用倍比稀释法测定两种方法提取的铁皮石斛挥发性成分及粗提物对供试菌的最低抑菌浓度,结果表明,两种提取方法提取的铁皮石斛挥发性成分及粗提物对大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为10mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5 mg/mL。金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度最低。同时蒸馏萃取法中铁皮石斛挥发性成分的抑菌作用强于索氏提取法中铁皮石斛粗提物的抑菌作用。铁皮石斛挥发性成分及粗提物均对革兰氏阳性菌的抑制作用更强。由试验结果可知,铁皮石斛挥发性成分中的主要抑菌物质有:植物甾醇类、丁香酚、2,6二叔丁基对甲酚(BHT)、松油醇、芳樟醇、反-2-己烯醛、苯酚等。