两种皮质发育障碍大鼠模型形态学研究和相关基因筛选

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目的:构建两种皮质发育障碍( disorders of cortical development, DCDs)动物模型,研究模型的形态学特征以及共同的差异基因,为进一步研究DCDs的形成机制提供基因水平研究平台。方法:用两种方法制备DCDs模型:①射线损伤模型(射线组):采用剂量为1.45Gy的γ-射线照射妊娠15天Sprague-Dawley(SD)大鼠制作子代大鼠DCDs模型;②卡莫司汀(carmustine,1-3-bis- chloroethyl-nitrosourea,BCNU)药物损伤模型(药物组):取妊娠15天的SD大鼠,腹腔注入卡莫司汀,制作子代大鼠DCDs模型。同时设正常对照组。对两种DCDs模型的形态学比较研究包括:①两个实验组子代大鼠出生第30天(P30)断头处死取脑,常规病理学检查,观察脑皮质和海马结构,比较两种模型在病理表现上的异同。②免疫组化方法观察Cajal-Retzius(CR)细胞在两个实验组子代大鼠大脑皮质中的阳性表达。以上两项均与正常对照组比较。取两种DCDs模型的子代新生鼠(P0)全脑做基因芯片扫描,结果与正常对照组比较,获得两种模型共有的差异基因。各组子代鼠P0取脑组织,分别提取总RNA,纯化合成双链cDNA;采用体外转录方法获
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