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肾细胞癌(Renalcellcarcinoma,RCC)占全身恶性肿瘤的3%,大约1/3的病人在诊断时已经有转移;根治性肾切除术是主要的治疗手段,但术后30%发生一复发或转移。肾癌对化疗和放疗都不敏感,IL-2和/或IFN-a治疗晚期肾癌有一定疗效,但反应率低(20%),完全反应率仅6%。因此,晚期肾癌预后差,迫切需要寻找新的有效的治疗方法。
树突状细胞(Dendriticcells,DC)是专职抗原呈递细胞(Antigenpresentingcells,APC),能诱导抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。由于具有抗原递呈功能的DC在体外大量培养的成功,以DC为基础的免疫治疗的临床研究得到广泛开展。
细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-inducedkillercells,CIK)是外周血单个核细胞在体外与多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群高表达CD3+和CD56+异质细胞,兼有T淋巴细胞抗肿瘤活性和NK(Naturekiller)细胞的非MHC(Majorhistocompatibilitycomplex)限制性杀瘤优点。
本研究用负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗治疗12例晚期肾癌,同时联合CIK细胞治疗,观察近期疗效、治疗前后患者T淋巴细胞亚群变化及副作用。
方法:
1.DC疫苗和CIK细胞制备:分离患者外周血单核细胞,体外经GM-CSF和IL-4诱导产生DC细胞,并负载自体肿瘤细胞裂解物;T淋巴细胞经IFN-γ、IL-2、CD3单抗、IL-1α体外诱导产生CIK细胞。
2.流式细胞仪检测DC和CIK细胞的免疫表型。
3.DC疫苗+CIK细胞治疗:12例晚期肾癌患者均在手术后开始治疗。DC疫苗皮内注射,每周一次,至少8周,每次治疗细胞数量大于1.0×106;CIK过继细胞免疫治疗,每2周一次,至少治疗8周,每次回输细胞数量大于1.0×109。
4.疗效评价:临床疗效通过影象学检查进行评估,治疗前后患者免疫功能变化通过外周血T淋巴细胞亚群进行评估。
结果:
1.DC和CIK细胞表型分析结果:培养的DC既表达成熟DC特异性表面标志CD83,同时也表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原和CD80(B7-1)、CD86(B7-2)等共刺激分子;CIK细胞是一群异质细胞,高表达CD3+CD56+。
2.12例患者治疗时间为2~6月,中位时间2月。每次DC治疗细胞数为0.5×106~28×106,中位细胞数量为1.5×106,12例患者共行DC疫苗治疗148次;每次回输CIK细胞数为1.0×109~15×109,中位细胞数量为4.7×109次,12例患者共行CIK免疫治疗74次。
3.12例患者随访时间9~27月,中位时间15月。治疗过程中无患者CR,1例患者PR,其他患者均为SD或NPD,客观有效率(CR+PR)8.3%,6例患者最终PD或死亡,另6例患者至随访时间末仍SD或NPD,疾病控制率(CR+PR+SD)50%。4例患者死亡,其生存时间分别为10、15、15和20月。8例患者生存,已随访时间分别是9、9、15、15、16、20、24和27月。
4.治疗期间患者外周血T淋巴细胞亚群没有变化。
5.除一过性畏寒低热等不适外,无严重的不良反应。
结论:
1.负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK细胞治疗晚期肾癌有一定的近期临床疗效,副作用小,有良好的耐受性。
2.但本研究病例数较少、随访时间短,长期疗效有待进一步观察。