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研究目的噻虫胺（clothianidin）是第二代新型烟碱类广谱内吸杀虫剂,主要通过作用于昆虫神经细胞上的乙酰胆碱型受体,使神经体持续激活,虫体持续痉挛,麻痹死亡。与第一代相比,其分子结构的主要差别为:氯代噻唑基团取代了吡啶基团;硝基亚胺取代了硝基亚甲基部分,这一改变使得其杀虫活性更高,杀虫谱更广。少量的噻虫胺残留不会对人体造成立即的、直接的毒害,但长期食用受其污染的蔬菜可导致癌症、内分泌紊乱等疾病。本研究意在建立一种简便、快速、高效的噻虫胺残留检测方法,并寻找一种或多种比较敏感的生物标记物,作为噻虫胺污染蔬菜的早期诊断指标。研究方法1.田间试验田间试验小区面积20m2,两种施药剂量（按有效成份计）分别为50g/hm2（推荐量）和200g/hm2,当幼苗长至10cm左右时第一次喷药,以后每隔2d喷一次,共喷施3次。另设一空白对照小区。最后一次施药后的第0d、1d、3d、5d、7d、10d、12d,用“Z”型法采集健康生长的全株小白菜进行农残及生物标志物分析,农残检测增加了第15d的检测。实验每天取样测定时均设6个重复,各取6个重复的平均值。2.噻虫胺残留测定采用丙酮提取,硅胶色谱柱净化,旋转蒸发仪浓缩,高效液相色谱（LC-10Avp,ODS色谱柱）法检测其农药残留量。3.生物标志物检测过氧化物酶（POD）活性测定采用愈创木酚法,多酚氧化酶（PPO）活性测定采用分光光度法,谷胱甘肽（GSH）含量测定采用Ellman法,丙二醛（MDA）含量测定采用硫代巴比妥酸法,超氧阴离子自由基（O2-·）含量测定采用羟胺氧化反应法,可溶性蛋白质的含量测定考马斯亮蓝法。研究结果1.噻虫胺残留动态噻虫胺残留检测方法的平均加标回收率为93.02%～94.4%（n=6）,相对标准偏差为3.3%～5.4%（n=6）;残留消解动态研究结果:低浓度处理组的半衰期T1/2为1.61d,残留动态方程为CT=28.633e-4301T,相关系数r=0.9455（n=6）;高浓度处理组的半衰期T1/2为2.05d,残留动态方程为CT=85.816e-0.3374T相关系数为r=0.9578（n=6）,10d后残留量均低于5.0mg/kg。2.噻虫胺胁迫对小白菜蛋白质含量的影响处理组的蛋白质含量均明显低于对照组,浓度越高蛋白质含量越低,低浓度组第5d达到最低值,此后逐渐增加,12d左右与对照组基本一致;高浓度组蛋白质第1d后开始降低,第7d达到最小值,12d时仍与对照组有显著性差异。3.噻虫胺胁迫对小白菜PPO活性的影响处理组的PPO活性均于喷洒农药当天即开始明显升高,低浓度组PPO活性于第5d达到最大值,此时,PPO活性为对照组的1.17倍,此后逐渐降低;高浓度组PPO活性于第7d达到最大值,此时PPO活性是对照组的1.4倍,此后呈下降趋势。4.噻虫胺胁迫对小白菜GSH含量的影响在胁迫初期GSH含量急剧降低,低浓度处理组GSH含量在第5d下降到最低点,高浓度处理组GSH含量在第7d下降到最低点,此后逐渐升高,在第12d左右与对照组GSH含量基本达到一致。5.噻虫胺胁迫对小白菜MDA含量的影响高、低浓度处理组MDA的含量较对照组均显著增高,且处理浓度越高,组织内MDA含量越高,最后一次施药当天,高浓度处理组MDA含量即为对照组的3.3倍,低浓度处理组为对照组的1.8倍,且两组MDA变化趋势相同,均为逐渐降低。6.噻虫胺胁迫对小白菜POD活性的影响低浓度处理组POD活性在施药后第5d达到最高值,而高浓度处理组在第7d达最高值,施药后的第12d左右,处理组POD活性与对照组POD活性基本趋于一致。7.噻虫胺胁迫对小白菜O2-·含量的影响O2-·含量与所遭受农药胁迫的浓度成正相关,高浓度处理组O2-·含量在整个实验期均高于低浓度处理组,并且随着时间推移含量逐渐降低。低浓度处理组在施用农药前5d O2-·含量高于对照组,第5d后其含量略低于对照组。结论1.本实验所采用的前处理及检测方法简化了操作步骤、缩短了提取时间和检测时间,而且能保证测定结果的准确性、可靠性,适合蔬菜中烟碱类农药残留的快速检测。2.噻虫胺农药在小白菜体内降解比较迅速,按常规用量,施药10d后采摘,噻虫胺残留可基本降解完全。3.POD、PPO、GSH、MDA、O2-·、蛋白质均可作为噻虫胺污染蔬菜的早期敏感生物检测指标,其中以蛋白质及GSH最为敏感。