磁标记免疫生物传感器氨基保护膜及其酶固定研究

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生物传感器是发展生物技术必不可少的一种先进的检测方法与监测方法,也是物质分子水平的快速、微量分析方法。磁电子技术与生物检测分析技术的结合,从20世纪90年代末期开始成为生物传感器领域的热门研究课题。本文中的磁标记免疫生物传感器是利用巨磁致电阻器件(自旋阀)对弱磁场变化非常敏感这一特性,结合免疫磁微球特异性等优点,达到检测微量病原体等生物体的目的。 磁标记免疫生物传感器技术平台主要由五大块构成:GMR自旋阀芯片、生物固定层、生物分子的固定、免疫磁微球、和检测系统。生物固定层的研制和生物分子的固定是本论文的核心研究内容,它可细分为:纳米级高分子保护层的制备、氨功能基团的表面改性、待测生物分予(抗原、抗体)的固定。 ●纳米级高分子保护层的制备: 1)采用旋转甩膜、紫外光固化的方法制备厚度为300-500纳米的环氧丙烯酸保护膜; 2)采用磁控射频溅射沉积法制备厚度为100-200纳米的氟-碳保护膜。 ●惰性高分子膜的表面改性: 采用低温等离子体磁过滤化学气相沉积法,通过调节溅射气压、功率、电流等一系列参数,改性上述纳米级高分子保护膜。通过红外光谱、光电子能谱对改性前后膜表面进行了成份分析,证明改性后的高分子膜面上成功接枝氨功能基团(NH<,2>-)。 ●待测生物分子(抗原、抗体)的固定: 1)采用双官能团试剂偶联法和物理吸附法在含氨基的保护膜上进行生物分子(纤维素酶)的固定; 2)采用双功能团试剂偶联法在制备有生物固定层的GMR自旋阀芯片上接挂小鼠抗人IgG、纯化人IgG、和免疫磁微球,得到传感器的实例检测信号; 3)提出静电场诱导吸附法固定生物分子,通过检测牛血清白蛋白和胃蛋白酶的固定量、活性等指标,评估静电场诱导吸附的可行性。 本文中两项关键技术的研究成果(1、与集成电路工艺相兼容的、具有保护性的、纳米级生物固定层的制备;2、电场诱导快速固定生物分子的实现)为实现磁标记免疫生物传感器的产业化奠定了基础。
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