大鼠脂肪干细胞分离培养及成脂成骨分化潜能的研究

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目的:研究脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)在体外分离培养和在一定条件下诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞的能力,探讨其作为骨组织工程细胞的可行性。方法:无菌切取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,Ⅰ型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞,接种至含10%胎牛血清的DMEM培养液,培养并适时传代,每日在倒置显微镜下观察并记录细胞形态和增殖特征。第3代细胞分别在成脂成骨诱导液中诱导分化,并采用油红染色,碱性磷酸酶(ALP)染色,Von Kossa染色进行鉴定。结果:从大鼠脂肪组织中分离出的脂肪干细胞,在体外呈成纤维细胞样迅速增殖,可在异丁基-甲基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素等诱导下,表现出脂肪细胞特性;可以在地塞米松、抗坏血酸、β—甘油磷酸钠的诱导下,表现出成骨细胞特性,该细胞碱性磷酸酶(ALP)染色ALP活性显著增高,Von Kossa染色出现矿化结节。结论:ADSCs易于在体外分离培养,并扩增迅速,其生物学特性稳定,经成脂诱导可分化为脂肪细胞,经成骨诱导可分化为成骨细胞,可作为骨组织工程的种子细胞。
其他文献
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)分子是一种低聚跨膜糖蛋白,分子量大约为290,000 Dalton,由5个同源亚基α2βγδ(胚胎型)或α2βεδ(成人型)组成,形成一个阳离子通道。nAChR存在