水稻T-DNA插入突变体库的构建及侧翼序列的分离

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ccicc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻是世界上重要的粮食作物之一,由于其基因组较小,遗传背景清晰,成熟的遗传转化体系,与其它禾本科植物存在广泛的共线性等特点,成为单子叶植物研究的模式植物。研究水稻目的基因组功能可以通过创造基因功能缺失突变体这个最为有效的途径进行。构建大量的水稻突变体库在研究水稻功能基因组中占有非常重要的作用。本研究是以水稻籼稻品种Kasalath为受体材料,通过构建pCAMBLA1301—pUC19载体,利用农杆菌侵染的方法转化至水稻中,获得如下结果:   1.利用限制性内切酶HindⅢ、XbaⅠ对pCAMBIA1301和pUC19进行双酶切,然后利用T4连接酶进行连接,成功构建pCAMBIA1301—pUC19载体。   2.以水稻籼稻品种Kasalath成熟胚诱导的愈伤组织为转化受体,利用农杆菌侵染法将pCAMBIA1301—pUC19导入Kasalath中,获得再生植株280棵。   3.通过对农杆菌介导的T—DNA插入遗传转化体系的优化,将对水稻籼稻品种Kasalath得到转基因苗的时间由3个月缩短至36天。通过统计分析Kasalath转化的分化率可达到3.5%。   4.对转基因植株进行PCR检测,结果表明pCAMBIA1301—pUC19已经整合到水稻基因组中。   5.利用质粒营救对转基因植物的T—DNA插入的侧翼序列进行测序,通过与GeneBank数据库进行比对,得到T—DNA插入位置。
其他文献
摘要:听、说、读、写是基本的语文能力,也是学生通出训练应提高的主要技能。因此,语文教学实践活动应从以下几方面展开。   关键词:培养能力;听说读写;语文学习  中图分类号:G633.3 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2018)11-0043  一、培养学生读的能力   古人云:“读书破万卷,下笔如有神。”读书是语言积累的重要途径。过分依赖教材,把学生的视野局限于课堂教学,实践上