背景：　　肺癌是肺部最常见的恶性肿瘤，是全球范围内高致死性的恶性肿瘤之一。根治性手术切除是目前治疗早中期肺癌首选方法。早发现、早治疗有助于延长肺癌患者的生存时间。然而，即使早期接受根治性切除术的患者，术后也有部分会出现复发和转移，主要包括肺、骨、肝、脑等脏器，是影响肺癌患者预后的关键因素。所以，研究针对肺癌转移的基因就显的尤为重要。　　RGMA是排斥性导向分子（RGMs）家族的成员之一。近来研究表明，RGMA是骨形成蛋白（BMPs）的合作受体,可能与肿瘤的发生发展有关。例如，在大肠癌细胞中 RGMA抑制肿瘤细胞的增殖和迁移，在经典的霍奇金淋巴瘤中被确定为肿瘤抑制的候选基因。此外，RGMA的表达水平可能与肿瘤进展和预后之间存在联系。在人类大肠癌，大肠癌组织与正常结肠相比RGMA表达显着降低。事实上，在腺瘤组织和大肠癌细胞株中RGMA的表达水平均较低。同时，在临床乳腺癌中发现临床预后较差的患者其 RGMA的表达水平较低。但是迄今为止还未见RGMA与肺癌预后相关性的研究报道。　　本课题通过实时-定量PCR检测RGMA基因在215例肺癌组织和正常肺组织中的表达水平，统计分析其表达水平与肺癌进展和预后的相关性。为临床应用RGMA作为候选靶点治疗肺癌转移和预测肺癌预后提供理论依据。同时，检测RGMA在不同肺癌细胞株中的表达水平，挑选出具有较高表达水平的肺癌细胞株构建稳定的RGMA基因敲除细胞株，为下一步验证RGMA对肿瘤细胞功能的影响和在BMP信号通路中的作用做准备。　　目的：　　1．统计分析RGMA在肺癌组织中的表达量与肺癌进展、转移和预后的相关性，为临床应用RGMA作为候选靶点治疗肺癌转移和预测肺癌预后提供理论依据。　　2.观察RGMA在肺癌细胞株中的表达情况，挑选出具有较高表达水平的肺癌细胞株构建稳定的RGMA基因敲除细胞株，为下一步细胞功能实验和BMP信号通路实验做准备。　　方法：　　1.应用real-time PCR方法检测RGMA在肺癌组织和正常肺组织中的表达量，分析其表达水平与临床病理、分期和预后的相关性。　　2.应用RT-PCR方法检测RGMA在不同肺癌细胞株中的表达水平。　　3.利用核酶技术，构建载体，通过电转染方法建立稳定的RGMA基因敲除细胞系，并通过real-time PCR和western-bolt验证。　　结果　　1.通过实时定量PCR检测RGMA的表达水平，发现NSCLC组织中RGMA的基因表达水平较正常肺组织低，差异具有统计学意义(P<0.001)。同时发现肺癌女性患者含有较高的RGMA表达水平。肺癌高分化人群含有较高RGMA表达水平（P<0.001），在较晚期患者中低表达（P<0.001）。RGMA高表达伴随着较好的临床预后和良好生存状态。　　2.RGMA在肺癌细胞株中广泛表达。通过 RT-PCR检测到RGMA在肺鳞癌细胞株H520、腺癌细胞株HCC827、PC-9、A549和原代培养细胞株Am1010、A0907中均有表达。　　3.建立了稳定的A549△RGMA基因敲除细胞系，在mRNA水平敲除率大于50％，在蛋白水平敲除率大于45%。　　结论：　　1.RGMA基因在女性，正常肺组织中表达较高。肺癌高分化人群含有较高RGMA表达水平，且RGMA高表达伴随着较好的临床预后和良好生存状态。然而在较晚期患者中低表达。这表明RGMA的表达水平可能与肺癌的分化和转移相关，同时与患者临床预后相关。RGMA可能作为候选靶点治疗肺癌转移，也可能作为肺癌患者临床预后的预测因子。　　2.RGMA在肺癌细胞株中广泛表达。选取表达水平较高的A549作为基因敲除的靶细胞。　　3.建立了稳定的A549△RGMA基因敲除细胞系，为下一步功能验证和信号通路研究做准备。