款冬花为菊科款冬属植物——款冬(Tussilago farfara L.)的干燥花蕾,是一种常用中药,具有润肺下气,化痰止咳的功效,在历版《中国药典》中均有记载。款冬花是重庆的一种道地药材,具有良好的应用前景。国内外关于款冬花的基础研究主要集中于款冬酮、芦丁、槲皮素等几种常见的有效成分,现行的质量控制标准也只对款冬酮进行含量限定,质控指标单一,缺乏针对有效的质量控制指标和相应的质控方法,款冬花药材质量、用药的有效性和安全性难以保证。针对上述问题,本论文在总结近年来关于天然植物分离分析和质量控制的文献基础上,将提取分离、纯化和分析检测技术有机结合,根据款冬花中不同类型化学成分的性质和特点,提出了多指标、多参数质控体系,重点针对款冬花的标示成分(款冬酮)、有效成分(黄酮类、有机酸类等)、毒性成分(生物碱)和可综合利用成分(多糖)这四个方面,开展了多种化学成分的高效分析方法和技术的研究,最终提出了款冬花药材质量控制指标的新方案建议。本文的主要研究工作及结果如下:(1)对款冬花的化学成分、分离分析方法、药理活性等进行了系统的文献综述,结合近年来天然植物分离分析和质量控制的相关研究,提出了款冬花质量控制指标研究的总体方案。(2)根据款冬花中有效成分、毒性成分、可综合利用成分的性质和特点,采用溶剂提取法对款冬花中有效成分进行了提取,应用柱层析、制备薄层色谱等技术对款冬花甲醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取浸膏进行系统分离,分离并鉴定了8种化合物。采用酸水提取法制备了款冬花总生物碱,通过酸性染料比色法测定了款冬花酸提物和总生物碱中的生物碱含量。采用水提醇沉法制备了款冬花多糖,然后经分级醇沉获得三种醇沉多糖即40%多糖(TPS-1)、60%多糖(TPS-2)、80%多糖(TPS-3),为款冬花有效成分、毒性成分、可综合利用成分的的分析提供了物质基础。(3)应用HPLC技术分析了款冬酮所处的萃取部位,研究了HSCCC溶剂体系的筛选方法,提出了高效分离的三元两相溶剂体系,建立了款冬酮快速分离制备的技术路线,同时制备了14-acetoxy-7β-(3’-ethyl cis-crotonoyloxy)-lα-(2’-methylbutyryloxy)-notonipetranone,为标示成分的高效制备和质量控制研究奠定了基础。(4)采用胶束毛细管电泳模式对款冬花甲醇提取物中的款冬酮进行了检测,测得药材中款冬酮含量为1.66 mg·g-1;重点开展了黄酮类、有机酸类等多种有效成分的HPCE同时测定研究,优化了影响电泳分离的主要参数,获得了款冬花甲醇提取物的最优分离条件,实现了款冬花中多种成分的在线同时检测,识别了2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、芦丁、异阿魏酸、金丝桃苷、阿魏酸、绿原酸、异绿原酸、槲皮素、没食子酸、咖啡酸等10种有效成分,并测定了除没食子酸外其他9种有效成分的含量。(5)针对款冬花中毒性生物碱含量低、难以检测的问题,首先应用吡咯显色法开展了总生物碱中的RET-PAs的衍生化研究,实现了总生物碱中RET-PAs的定量测定;然后采用场放大进样-胶束扫集两步富集技术,优化了影响分离和富集效果的因素,建立了基于HPCE技术的款冬花PAs高效快速分析方法,实现了款冬花总生物碱中克氏千里光碱和千里光宁碱的高效定量检测。与常规MEKC相比,该富集方法灵敏度有了较大的提高,富集倍数为12倍和15倍,检测限达2.8μg·L-1和4.2μg·L-1。并通过UV和MS技术鉴定了总生物碱中其他两种主要化合物,咖啡酸甲酯和阿魏酸甲酯。该方法还被应用到款冬花酸性提取物的PAs检测中,实现了克氏千里光碱的有效检测。(6)针对款冬花多糖的综合利用需要,应用苯酚硫酸法和间羟基联苯比色法考察了款冬花多糖(TPS)及三种醇沉多糖(TPS-1、TPS-2、TPS-3)的中性糖和酸性糖含量,通过红外对其构型进行了初步分析。结合多糖的多羟基结构,建立了PMP-CZE快速分析款冬花多糖中7种单糖的分析方法,优化了影响电泳分离的主要参数,确定了最优分析条件,实现了对款冬花多糖和三种醇沉多糖的单糖组成的快速分离和定量分析,为款冬花多糖组分的质量控制提供了有效的方法。采用DPPH法和CAA法分别从分子和细胞水平评价了粗多糖和三种醇沉多糖的抗氧化活性。测定结果显示款冬花多糖和三种醇沉多糖均具有抗氧化活性,其中TPS-2具有最强的抗氧化能力。结合酸性多糖的分子量、抗氧化活性及单糖组成信息,发现多糖的抗氧化活性与分子量、单糖组成有关。(7)基于上述研究,从标示成分、有效成分、毒性成分三个方面,初步设计了款冬花药材中质量控制指标的分析检测提高方案。新方案将影响用药有效性和安全性的重要指标——有效成分,毒性成分纳入质量控制体系,应用HPCE技术较为系统的对这些质控指标进行了分析和含量限定,完善了现有的质控指标,为款冬花的质量控制标准的提升和进一步开发利用奠定了基础。