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[背景]死亡时间(postmortem interval,PMI)或死后经历时间(the time since death,TSD)推断一直是法医学研究的热点和难点问题。准确地推断PMI,在提供案件线索、划分侦查范围、甄别犯罪嫌疑人等命案工作以及保险理赔、医疗纠纷等民事纠纷中均发挥重要作用。国内外学者应用分子生物化学、物理化学、振动光谱学、代谢组学、微生物组学等诸多学科成熟的技术方法,研究机体死后各种指标的时序性变化,取得了一系列新的研究进展。然而由于PMI推断受到个体差异、温度、湿度、动物昆虫破坏等体内外诸多因素的干扰,且诸多研究由于条件所限或操作繁琐,仅限于实验室层面,寻找简便、精确推断PMI的方法仍有待进一步研究。电导率(electrical conductivity,EC)最初为食品科学中评价肉类货架期的指标,已经被转化运用到法医学PMI推断的研究当中。有研究表明尸体腐败程度评分与累积温度日数(accumulated degree-days,ADD)相关性较好,建立的量化模型在PMI推断方面具有潜力。本课题组前期研究显示,在恒温条件下,组织EC与PMI相关性较好,且该测定方法快速、便捷,符合法医工作者在案发现场快速推断PMI的基本要求。本课题针对肌肉组织在室外环境温度下EC变化与TSD关系进行研究,记录室外环境温度变化,分析EC与TSD的关系,同时以室内恒温条件下EC的变化规律作为对照,初步探究利用EC和ADD推断TSD的可行性。同时进一步收集死亡案件尸体组织进行EC测定,试图分析环境温度对人体组织EC变化的影响,探讨EC在实际工作中推断PMI的可行性。[目的]1.在洛阳秋季室外环境条件下测定昼夜不同时间猪后腿肌肉EC值,同时与室内恒温条件下EC的变化规律对比,分析并比较两种环境条件下,EC值随TSD变化的规律,初步探讨环境温度对EC变化的影响。2.测定室外环境下不同时间间隔肌肉组织EC值,记录实验期间环境温度变化,初步探究运用EC和ADD推断PMI的可行性。3.测定死亡案件中死者肝、脾、肾、肺、胰腺、骨骼肌等组织的EC值,初步探究实际案件中影响EC推断PMI的因素,探讨EC在实际工作中的适用性。[方法]1.取5块即刻屠宰的猪后腿肌肉,均分为两份,随机分成两组,分别置于秋季室外环境(温度范围为12~22℃)和室内18℃恒温环境(相当于冬季室内暖气环境)中。并用温度记录仪每隔1h记录实验期间环境温度变化。在死后10d内分别于早晚8时(每隔12h)取5g组织移入研钵中剪碎,加入50ml超纯水,用剪刀不断搅拌并将组织剪成匀浆,30min后将液体过滤得质量浓度为0.1g/ml的肌肉浸渍液,用电导率仪测量肌肉浸渍液EC值,比较在两种环境模式下肌肉组织EC随TSD的变化规律。依据记录的室外环境温度,计算实验间隔12h内的平均温度累加获得ADD,探讨EC与ADD的变化规律。2.针对死亡案件,详细记录性别、年龄、死亡时间、环境温度、死亡原因等信息,尸体解剖后取肝、脾、肾、肺、胰腺、骨骼肌,剪碎研磨制成匀浆浸渍液,之后测定各组织浸渍液EC值。[结果]1.室外温度和室内18℃恒温条件下,肌肉浸渍液EC随TSD变化的趋势在整体上是相似的,二者相关性均较好,其二次拟合回归方程依次为:y(室外)=0.039x~2-1.68x+1479.12(R~2=0.97,P=0.004)y(室内)=0.025x~2+0.84x+1349.49(R~2=0.98,P=0.002)2.洛阳秋季室外环境下,实验时段温度波动在5.7~28.2℃区间,白天平均温度为18.4℃,夜间平均温度为11.9℃,肌肉的EC值在白天增长明显,夜间增长不明显,尤其环境温度低于13℃时,出现明显的平台现象,与室内恒温条件下肌肉EC值持续上升的变化趋势有显著的差异。3.室外温度下,肌肉组织EC随ADD累加而逐渐增大,两者相关性显著,其二次回归方程为:y=0.027x~2-2.92x+1590.54(R~2=0.96,P<0.05)。4.环境温度对尸体组织EC值测定结果影响较大,尸体组织EC随TSD的延长而逐渐增大。[结论]1.室内恒温下,肌肉组织EC与TSD相关性较好,提示肌肉组织EC测定在实际案件中推断晚期TSD具有一定的应用价值。2.在秋季室外环境温度下,白天EC值增长明显,夜间低温导致EC值增长缓慢,实际案件中运用EC具体分析时,应考虑到白天、夜间的差异。3.EC可作为尸体肌肉腐败程度评估的良好指标,肌肉EC在早期变化不明显,运用EC与ADD之间关系推断晚期TSD在实际案件中具有一定的应用价值,但仍需实际案例验证其准确性。4.实际死亡案件中,除去尸体个体因素(如死因),环境温度、死亡时间均会影响组织EC测定结果,初步探究了尸体组织EC死后变化情况。