论文部分内容阅读
目的：确定刺人参改善睡眠作用的有效部位并探讨其作用机制。方法：本实验以ICR小鼠为研究对象,首先采用戊巴比妥钠所致小鼠睡眠实验方法,验证了刺人参水煎液改善睡眠的作用；在此基础上,将刺人参水煎液用大孔吸附树脂技术分离成10%、30%、60%三个不同浓度的乙醇洗脱部位,再采用戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间实验方法进一步确定刺人参改善睡眠作用的有效部位；在此基础上,再采用上述试验方法开展刺人参有效部位改善睡眠作用的量效关系及时效关系研究；最后用戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间实验方法探讨了刺人参有效部位改善睡眠作用与GABA的相关性,并用ELISA法分别测定了小鼠海马、皮质、下丘脑中DA、GLU、NE、5-HT、NO、NOS等物质的含量,开展了刺人参有效部位改善睡眠作用的机制研究。结果：1、刺人参水煎液对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间影响的研究表明：与空白对照组相比,阳性对照组能显著缩短小鼠睡眠潜伏期且显著延长睡眠时间(p<0.05),表明该试验方法可靠。而与空白对照组比,刺人参各剂量组均能显著延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间(p<0.05)；刺人参各剂量组的睡眠潜伏期呈现缩短趋势,其中64g/kg组与空白对照组有显著性差异(p<0.05)。2、刺人参水煎液对阈下剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠发生率影响的研究表明：与空白对照组相比,阳性对照组能显著缩短小鼠睡眠潜伏期且显著延长睡眠时间(p<0.05),表明该试验方法可靠。而与空白对照组比,刺人参各剂量组的睡眠发生率均延长,其中32g/kg、64g/kg组与空白对照组有显著性差异(p<0.05)。3、刺人参不同浓度乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间影响的研究表明：与空白对照组相比,阳性对照组能显著缩短小鼠睡眠潜伏期且显著延长睡眠时间(p<0.05),表明该试验方法可靠。与空白对照组比,10%乙醇洗脱部位与30%乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期与睡眠时间无明显差异,而60%乙醇洗脱部位明显缩短了睡眠潜伏期且延长其睡眠时间(p<0.05)。且与刺人参水煎液组比较,60%乙醇洗脱部位显著延长了小鼠睡眠时间(p<0.05)。4、刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)改善睡眠作用的量效关系研究表明：刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)改善睡眠的作用呈现一定的量效关系,在一定剂量范围内,随着剂量增加,药效增加,主要表现为缩短戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期(p<0.05)且延长其睡眠时间(p<0.05)。其起效剂量为16g/kg,最佳有效剂量为64g/kg。5、刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)改善睡眠作用的时效关系研究表明：刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)改善睡眠的作用呈现一定的时效关系,在一定时间范围内,随着给药天数的增加,药效增加。,主要表现为缩短戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期(p<0.05)且延长其睡眠时间(p<0.05)。其起效给药时间为5days,最佳给药时间为7days。6、刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)联合氟马西尼(Flumazenil)对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间影响的研究表明：与空白对照组比较,单独给予刺人参有效部位(64g/kg)和地西泮(2.5mg/kg),均延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间且缩短其睡眠潜伏期；氟马西尼可以明显阻断地西泮和刺人参有效部位与戊巴比妥钠的协同作用。7、刺人参有效部位(60%乙醇洗脱液)对小鼠脑内DA、GLU、NE、5-HT、NO、NOS含量影响的研究表明：刺人参有效部位(64g/kg)能明显增加小鼠海马中DA的含量(p<0.01),而降低皮质(p<0.05)与下丘脑中DA的含量；明显降低小鼠皮质中GLU的含量(p<0.05),而对海马与下丘脑中GLU含量的影响较小；明显增加小鼠海马中NE的含量(p<0.05),而降低皮质(p<0.05)与下丘脑中NE的含量；明显增加小鼠海马中NO的含量(p<0.01),而降低皮质与下丘脑中NO的含量(p<0.05)；有降低小鼠海马皮质、下丘脑中的5-HT、NOS含量的趋势。结论：1、刺人参改善睡眠作用的有效部位是：刺人参水煎液60%乙醇洗脱部位。2、刺人参有效部位(60%乙醇洗脱部位)最佳给药剂量为64g/kg,最佳给药时间是7天。3、刺人参有效部.位(60%乙醇洗脱液)改善睡眠的作用机制：通过增强GABA对苯二氮卓类受体的作用,降低兴奋性的中枢神经递质DA、NE、GLU的含量,增加NO的含量,影响NOS活力,还可能抑制小鼠脑内5-HT能神经元,减少5-HT的释放来改善睡眠作用的。综合以上研究结果,我们认为刺人参有效部位改善睡眠的作用与中枢神经递质调节机制与一氧化氮调节机制有关。