论文部分内容阅读
目的:检测在维生素E琥珀酸酯(VES)对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞增殖分化及RAR-α蛋白表达水平的作用。方法:1.细胞增殖的测定:取体外培养的对数生长期急性早幼粒细胞白血病细胞株——NB4细胞,分别应用10μmol/L,20μmol/L,30μmol/L,40μmol/L维生素E琥珀酸酯处理NB4细胞72小时,收集细胞并应用台盼蓝染色计算细胞存活率。2.细胞分化的测定:取体外培养的对数生长期急性早幼粒细胞白血病细胞株——NB4细胞,分别应用10μmol/L,20μmol/L,30μmol/L,40μmol/L维生素E琥珀酸酯处理NB4细胞72小时,收集细胞并应用NBT还原实验检测细胞分化情况。3. RAR-α蛋白测定:应用Western blot方法。上述对数生长期NB4细胞分别经VES(20μmol/L)、ATRA(1μmol/L)、VES(20μmol/L)联合ATRA(1μmol/L)处理48小时,并设空白对照组;收集细胞,提取蛋白质后测定RAR-α蛋白表达水平。结果:1.维生素E琥珀酸酯对NB4细胞增殖的影响:应用10μmol/L,20μmol/L,30μmol/L,40μmol/L维生素E琥珀酸酯处理NB4细胞72小时,活细胞比率分别为89.13%、90.85%、73.95%、72.79%2.维生素E琥珀酸酯对NB4细胞分化的影响:用10μmol/L,20μmol/L,30μmol/L,40μmol/L维生素E琥珀酸酯处理NB4细胞72小时,并设置空白对照组。其NBT阳性比率分别为21.17%、27.33%、9.50%、6.00%;对照组NBT阳性比率为1.67%。3.维生素E琥珀酸酯对NB4细胞RAR-α蛋白表达的影响:联用VES(20μmol/L)及ATRA(1μmol/L)组48小时后PML/RAR-α融合蛋白总量较单用ATRA(1μmol/L)组增加,单用VES(20μmol/L)组及联用VES(20μmol/L)及ATRA(1μmol/L)组48小时后的野生型RAR-α蛋白表达量高于对照组及单用ATRA(1μmol/L)组。结论:VES抑制NB4细胞增殖并诱导其分化;VES,或者与ATRA联合,能够诱导NB4细胞高表达RAR-α和PML-RAR-α蛋白。