DON即呕吐毒素,又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇,主要是由镰刀菌产生的一种真菌毒素,广泛存在于受污染的谷物、谷物制品及饲料中,严重影响谷物及其制品的食用安全。过量摄入呕吐毒素可严重威胁人或动物的健康,因而呕吐毒素的脱毒研究成为当前的研究热点。本研究是采用生物法降解呕吐毒素,使用高效液相色谱法检测呕吐毒素浓度。通过将产毒禾谷镰刀菌接种在玉米中,从玉米提取呕吐毒素并将其作为唯一碳源,从土壤中分离筛选呕吐毒素降解菌。选择降解效果大于30%的菌株以标准品为底物进行复筛,得到两株降解效果高达68.40%的菌株FMM-1和84.62%的菌株FMM-hx。对菌株FMM-1和菌株FMM-hx进行形态检测,并提取菌株FMM-1和菌株FMM-hx的全基因组DNA,PCR扩增16S rDNA后进行测序分析。将测序结果与Genbank数据库进行序列对比,结果显示菌株FMM-1与绿脓杆菌的同源性高达99%,表明菌株FMM-1是绿脓杆菌。菌株FMM-hx与地衣芽胞杆菌的同源性高达99%,表明菌株FMM-hx是地衣芽胞杆菌。对绿脓杆菌FMM-1的上清液、菌体细胞、细胞破碎液进行呕吐毒素降解效果检测,上清液的降解率为54.02%,细胞的降解率为6.64%,细胞破碎液的降解率是2.45%。对上清进行热处理后的降解率下降了13.00%,结果表明绿脓杆菌FMM-1降解的活性成分主要为胞外酶。研究温度、pH以及金属离子对上清液降解活性的影响表明:降解反应的最适温度为45℃,最适pH值为7.0,Cu²⁺、Mn²⁺能够促进降解活性,降解率分别提高了16.86%,9.73%,而Zn²⁺、Fe²⁺、Ca²⁺具有抑制降解活性,降解率分别降低了11.52%,27.15%,38.38%。通过对地衣芽孢杆菌FMM-hx的上清液、菌体细胞、细胞破碎液进行降解研究,上清液的降解率为76.83%,细胞的降解率是15.45%,细胞破碎液的降解率为19.09%,结果表明地衣芽孢杆菌FMM-hx对呕吐毒素的降解是酶促降解作用以及菌体细胞的吸附作用共同作用的结果,但起主要降解作用的胞外酶。研究温度、pH以及金属离子对上清液降解活性的影响表明:降解反应的最佳温度为40℃,降解反应的最佳pH值为6.5,其中金属离子Mn²⁺对降解活性具有显著的促进效果,降解效果提升了15.32%,Mg²⁺和Zn²⁺对降解活性作用效果并不明显,降解活性分别仅提高了4.80%,5.93%,而Cu²⁺、Fe²⁺、Ca²⁺对降解活性具有抑制作用,降解率分别降低了19.50%,23.38%,9.45%,Cu²⁺和Fe²⁺的抑制效果最为显著。对霉变的玉米用超声波提取呕吐毒素,结果表明用超声波提取后玉米中的毒素含量降低95%。用绿脓杆菌FMM-1对提取液进行处理,结果表明与对照组相比,用绿脓杆菌FMM-1处理的提取液中呕吐毒素的降解率为50.00%。用地衣芽孢杆菌FMM-hx处理后,提取液中的呕吐毒素降解率为70.98%。结果表明我们筛选到的两株降解菌能够降解玉米中的呕吐毒素。研究了地衣芽孢杆菌FMM-hx降解酶的降解效果并对其进行了初步的分离纯化。但分离的蛋白条带并不单一,难以确定目的条带,因而需要进一步的分离纯化。通过筛选呕吐毒素降解菌,并研究影响降解菌降解活性的相关因素,为绿脓杆菌FMM-1和地衣芽孢杆菌FMM-hx在生物降解呕吐毒素方面的进一步研究奠定了基础。