背景:代谢综合征包括高血压、高血脂、胰岛素抵抗、肥胖等疾病,其严重影响人们的健康,对人们的生活造成很大的困扰。因其发病机制复杂,所以难以治疗,寻找相关疾病的药物及新的治疗靶点刻不容缓。GPCRs受体家族中的多巴胺第二受体,其激动剂对运动功能以及机体代谢都有显著的影响。本研究通过实验室前期建立的GPCR筛选系统对多巴胺第二受体的中药小分子化合物激动剂的筛选,和对代谢性疾病的药效研究来发现中药治疗代谢性疾病的新机制。目的:本实验选择DRD2为靶点,从中药化合物库中筛选出具有激活DRD2小分子化合物,并研究其对代谢性疾病的药效作用。同时通过体外的分子生物实验探究其作用机制,为治疗代谢性疾病的新药开发提供药理学基础和新方向。方法:1.通过GPCRs高通量筛选系统的方法,进行细胞体外的筛选。从1000多个天然产物中筛选出可以激活DR2R的激动剂的中药小分子化合物,并进一步做浓度依赖性实验。2.对阳性化合物通过同系列受体以及5HT受体活性比较进行特异性验证。3.cAMP的检测来验证其激动活性。4.利用肥胖动物模型,高脂餐诱导的肥胖C57BL/6小鼠(DIO),进行药效学评价,研究DRD2激动剂在肥胖性疾病的治疗作用。结果:1.通过GPCR高通量筛选系统筛选出具有激活DRD2的7个天然中药小分子化合物,分别为:大麦芽碱(Hordenine)、3,4-二羟基苯甲酸酯(Methyl 3,4-dihydroxybenzoate)、4-甲基-7-乙氧基香豆素(7-Ethoxy-4-methylcoumarin)、氢溴酸槟榔碱(Arecoline)、苍术酮(Atractylon)、雷公藤春碱(wilfortine),土木香内酯(Alantolactone),且呈剂量依赖性。2.部分中药小分子化合物(大麦芽碱、3,4-二羟基苯甲酸酯、4-甲基-7-乙氧基香豆素、氢溴酸槟榔碱、雷公藤春碱)特异性激活DRD2。3.所检测化合物均能够激动DRD2的活性,抑制cAMP的浓度。4.小分子化合物(3,4-二羟基苯甲酸酯)可以通过减少摄食,加快能量代谢,来降低肥胖动物的体重。结论:天然小分子化合物大麦芽碱(Hordenine)、3,4-二羟基苯甲酸酯(Methyl 3,4-dihydroxybenzoate)、4-甲基-7-乙氧基香豆素(7-Ethoxy-4-methylcoumarin)、氢溴酸槟榔碱(Arecoline)、苍术酮(Atractylon)、雷公藤春碱(wilfortine)、土木香内酯(Alantolactone)均能剂量依赖性的激动DRD2受体。其中大麦芽碱、3,4-二羟基苯甲酸酯、4-甲基-7-乙氧基香豆素、氢溴酸槟榔碱、雷公藤春碱可能为特异性激动剂。通过高脂饮食诱导的肥胖动物模型研究表明,3,4二羟基苯甲酸酯可能是通过减少摄食,加快能量代谢,从而降低肥胖动物的体重,来达到治疗代谢性疾病,本实验为运用此类GPCR药物的筛选提供理论基础,同时为DRD2的在代谢性疾病方面提供了药理学基础。