四川玉米串珠镰刀菌产毒素能力及产伏马菌素基因的检测

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玉米穗腐病,属世界性病害,可由多种镰刀菌和其它真菌引起,而串珠镰刀菌是玉米穗腐病的主要致病菌。它引起的穗粒腐不仅使玉米籽粒产量降低,品质变劣,而且病籽粒中存在着病菌产生的真菌毒素。人畜食后可导致多种中毒症,严重影响健康。因此开展玉米串珠镰刀菌产毒素的研究,在理论和实践上均有重要意义。我们于2007年—2008年在四川省在六个地区采集由串珠镰刀菌致病的病穗标样,经组织分离和单孢分离共获得48个串珠镰刀菌,探讨了串珠镰刀菌产生毒素的条件、不同地区菌株产毒能力及从分子水平上检测其产毒基因,其结果如下:1.串珠镰刀菌产毒素和菌体生长的条件研究:选用3个不同地理来源的菌株作为供试菌,研究培养基、温度、培养时间及不同PH值对菌体的生长和产毒素的影响。结果表明,培养基对毒素的产生有明显的影响,在供试的4种培养基中,3个供试串珠镰刀菌在在Richard培养基中产毒量最高,在第10天毒素的浓度最大;PH5和25℃时最适于串珠镰刀菌产毒素。培养基对菌体生长也有影响,在供试的4种培养基中,3个供试菌株在PS或PD培养基中菌丝体生长量最大,在第20天、PH3和20℃—30℃时菌丝生长量达到最大。表明串珠镰刀菌产毒素的条件和菌丝体生长的条件是不一致的。2.四川玉米串珠镰刀菌株产毒素能力的测定:选用最适产生毒素的Richard培养基和产毒条件。对四川6个市县的48个菌株进行产毒素培养,采用对玉米胚根抑制率的生物测定法,测定了它们产毒素的相对量,比较产毒素能力。结果表明,供试的48个玉米串珠镰刀菌均能产生毒素,且产毒能力均较强。但菌株间产毒素能力大小存在明显差异。雅安菌株CHB—18产毒能力最强,泸州菌株LZ—4产毒能力最弱。未发现菌株的地理来源与产毒素能力有联系性。即在同一地理来源的菌株,也存在产毒素能力的大小不同。研究结果还表明,采用适宜的产毒素培养条件,应用抑制胚根生长的生物测定法,能测定出菌株产毒素能力的强弱,是一种简单、准确和经济的方法。3.四川玉米串珠镰刀菌产伏马菌素基因的检测:采用一对Fum5F/Fum5R特异引物对四川48个玉米串珠镰刀菌的总DNA进行PCR扩增,检测菌株是否具有伏马菌素合成的关键基因(fum1基因)。结果表明,在48个菌株中有41个菌株具有产毒素基因,占供试菌株的85.42%,表明四川菌株普遍具有产伏马菌素的关键基因。四川很多菌株具有产生真菌毒素伏马菌素的能力,这为食品的毒素安全检测提供了一定依据。
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