前言 平阳霉素碘油乳剂经肝动脉插管灌注治疗肝血管瘤目前国内已经广泛开展，其疗效肯定。平阳霉素作为一种国产抗肿瘤抗生素，最初用于恶性肿瘤的全身化疗。当其累计用量达到450毫克时30％的患者会出现严重的肺纤维化。当我们在临床中使用平阳霉素碘油混合乳剂介入治疗肝血管瘤时，有必要探讨一下其是否会对正常肝脏组织产生影响，是否也会造成正常肝组织纤维化。本研究旨在通过动物实验模拟肝血管瘤临床介入治疗过程，对上述问题作初步探讨。 实验材料与方法 1．动物模型的制备：日本大耳白兔18只，按注入平阳霉素碘油乳剂(PLE)的量分四组： 假手术组：经肝动脉注入生理盐水0.4毫升(2只兔) 实验A组：0.08ml碘油+0.3mg平阳霉素+0.2ml生理盐水(5只兔) 实验B组：0.2ml碘油+1.2mg平阳霉素+0.2ml生理盐水(8只兔) 实验C组：0.2ml碘油+2.0mg平阳霉素+0.2ml生理盐水(3只兔) 全麻下开腹，细针穿刺肝动脉，将上述各组药物分别注入。 2．取材：假手术组2只兔，A组全部5只兔及B组中的5只兔(共8只)分别在术后第7、14，28，42天，开腹取材，取材组织福尔马林液固定。B组中余下的三只及C组全部三只分别于第6， 10且 周取材。 3．病理观察：取材标本福尔马林固定后，常规石蜡包埋，snun 连续切片＊E染色及血小板衍化生长因子B链（PDGF－B）免疫 组织化学染色。 4·免疫组织化学定量分析：使用MetaMorph／DP10／BXS彩色 显微图象分析仪做组织化学定量分析。采用SPSS10．0统计软件 对数据做统计分析。 实验结果 1．HE染色结果：光镜下显示高剂量组闷组）中第14天肝细 胞变性最重，大量淋巴细胞浸润。随时间推移，肝细胞变性在减 轻。而纤维化则在第4周出现，最初表现是门管区扩大，纤维结缔 组织增生，到第六周门管区增生的纤维组织逐渐向小叶内伸展分 割，部分肝组织形成明显的假小叶结构。到第10周，14周时，增 生的纤维结缔组织进一步增多，肝纤维化更为广泛。当平阳霉素 的量增加到2．0毫克时，第十周3只实验兔中有一只出现一直径 约1．0厘米的结节，镜下为增生的纤维团块。低剂量组u组）则 呈一过性肝细胞水样变性，第二周时变性最重，观察至第六周时，。细胞变性明显减轻，肝内未见明确纤维化改变。gZ·PDGF－B免疫组化结果：PDGF－B最高表达出现在第二－周，到第六周已经有明显下降。抗原表达主要集中在细胞膜和纤＠””’—””’”””“”————’”””一”’“—“—””———————”””’一 一’”—一” 维间隔中。显微病理图象分析仪对染色结果做定量分析。采用积 分光密度值OOD）作为统计指标。实验A组IOD值在第H周时 达到高峰，与第一周和第六周比有统计学差异h＜0．01，p＜0． 05人实验B组扣D在第H周时达高峰，与第六周时＊D值比有 显著统计学差异帅＜0．of人实验 A组和 B组 IOD值与假手术组 比较，均有显著统计学差异h＜0．of人 ·2· 讨 论 由于我们无法复制肝血管瘤的动物模型，为研究经肝固有动 脉灌注PDe治疗肝血管瘤会对正常肝组织产生多大损伤，我们根 据经肝固有动脉灌注碘油乳剂后正常肝组织与肿瘤组织中碘油的 分配比设计了两组剂量，实验A组：既目前临床常用量门 毫 克八实验B组：既目前临床用药上限N0毫克八将上述剂量分别 注人兔正常肝脏中。我们发现低剂量组u组）呈一过性肝细胞 水样变性。高剂量组门组）第H周时肝细胞变性最重，第六周时 可见部分假小叶形成。 PDGF－B免疫组化结果分析表明：PDGF－B参与了PLE介 导的肝纤维化过程。 任何可引起肝损伤的因素长期作用于肝脏均可产生肝细胞变 性，坏死，继而肝细胞再生和肝纤维组织增生，导致肝纤维化。本 实验通过肝动脉灌注碘油平阳霉素乳剂制成的肝纤维化模型属于 化学损伤性模型。较CCM复合法简便宜操作，一次造模即可，影 响因素少，理论上模型可重复性应较好。 结 论 二．经肝动脉灌注碘油平阳霉素乳剂治疗肝血管瘤，在采用临 床较高剂量用药K0毫克）时将会导致肝细胞变性，肝纤维化形 成。 2．该纤维化形成是由PDGF－B作为启动因子所引发的。 3．为减少对正常肝组织的损伤，宜采用临床较低剂量用药 二 毫克）。一，4．经肝动脉注人碘油平阳霉素乳剂制成的肝纤维化模型是 一种较为理想的肝纤维化模型。