二次脑损伤后c-fos基因表达与β-内啡肽的变化及意义

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颅脑外伤后并发二次脑损伤(secondary brain insult, SBI)是影响颅脑伤病人预后的一个关键因素。本实验在Marmarou 弥漫性脑损伤(diffuse brain injury,DBI)模型的基础上,建立大鼠SBI 模型,观察DBI 及其合并SBI 后脑内c-fos 基因表达、血浆β-内啡肽(beta-endorphin,β-EP)的变化规律,来探讨二者在SBI发病机制中的作用,并观察盐酸纳洛酮对二者在SBI 后变化的影响。本研究分3部分:一、大鼠DBI 合并SBI 后脑内c-fos 基因表达及血浆β-EP 的变化方法:163 只雄性SD 大鼠随机分为正常对照、假手术、单纯脑缺血、单纯DBI 和DBI 合并SBI 五组。单纯DBI 参照Marmarou 模型制作。在DBI 基础上,结扎双侧颈总动脉30min,制成DBI 合并SBI 大鼠模型。分别采用免疫组化及放免分析测定大鼠脑内c-fos 蛋白与血浆β-EP 的含量,并进行脑组织病理显微结构的观察。结果:DBI 合并SBI 组伤后c-fos 基因表达呈双峰特征,分别于伤后3h、24h 出现两个高峰,伤后3h 至48h c-fos 基因表达均明显高于单纯DBI 组及单纯脑缺血组(P<0.05)。DBI 合并SBI 组大鼠血浆β-EP 水平在伤后1h 达高峰,至伤后48h 仍未恢复正常(P<0.05)。与单纯DBI 组及单纯脑缺血组相比,伤后各时间点均明显增加(P<0.05)。在伤后12h DBI 合并SBI 组创伤性脑水肿程度明显高于单纯DBI 组及单纯脑缺血组(P<0.05)。伤后6h DBI 合并SBI 组神经元损伤数目明显高于单纯DBI 组及单纯脑缺血组(P<0.05)。结论:大鼠脑内c-fos 基因表达增加、血浆β-EP 水平明显升高参与了DBI 合并SBI 后病理生理过程,提示两者同SBI 发生密切相关。二、盐酸纳洛酮对大鼠DBI 合并SBI 后c-fos 基因表达、β-EP 的影响方法:在DBI 后合并SBI 前及DBI 合并SBI 后,腹腔注射盐酸纳洛酮(3.0mg/kg ),观察大鼠行为、脑组织含水量、损伤神经元数、脑内c-fos 阳性细胞数及血浆β-EP 的变化。结果:盐酸纳洛酮可降低DBI 合并SBI 大鼠死亡率、损伤神经元数、脑组织含水量及血浆β-EP,减少DBI 合并SBI 后的大鼠脑内c-fos
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