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代谢型GABAB受体是中枢神经系统中主要抑制性神经递质γ–氨基丁酸的受体,它位于细胞质膜上,属于C家族G蛋白偶联受体,其拓扑结构包含N端保外区、跨膜区、C端胞内区。人源功能性GABAB受体由GB1与GB2亚基组成异源二聚体复合物,GB1亚基负责结合配体、GB2亚基负责偶联G蛋白而开启下游信号通路。GB2亚基可以单独于细胞内上膜表达,GB1亚基C末端含有一段内质网滞留信号序列,阻止了其单独上膜表达。但是GB1与GB2亚基共同于细胞中表达时,它们的C末端能够形成具有强烈相互作用的Coiled–Coil超二级结构,从而屏蔽了内质网滞留信号对GB1亚基的影响,使得GB1&GB2异源二聚体能够正常上膜表达并行使生理功能。与人源不同的是,果蝇GABAB受体有DGB1,DGB2,DGB3三个亚型,其中已知DGB1与DGB2能够组成异源二聚体复合物,DGB3亚基的生理功能尚不清楚。本文首先针对果蝇GABAB受体DGB1与DGB2亚基C末端氨基酸序列利用生物信息学手段进行蛋白质二级结构预测,发现存在可能形成α螺旋的区域。之后我们根据人与果蝇GABAB受体C末端序列比对的结果,并参考已有文献报道的人源GABAB受体C末端Coiled–Coil结构域复合物的晶体结构,设计了6组可能存在相互作用的氨基酸序列,全部分别构建至His和GST标签的表达载体中,利用大肠杆菌表达系统进行初步的表达与纯化。利用纯化得到的蛋白,接下来我们通过GST–Pull Down实验确定了两个亚基的C末端存在相互作用的氨基酸序列范围。最终我们设计了一组DGB1与DGB2亚基C末端的氨基酸序列,构建至不同的表达载体后,探索出了最合适的方法并利用大肠杆菌表达系统表达、纯化出Coiled–Coil结构域复合物,进行了晶体生长条件的初步筛选。本论文选题对于探究果蝇GABAB受体C末端的结构具有重要意义,有助于解释果蝇中这一功能性异源二聚体的上膜表达机制,为GABAB受体结构与功能的更详细研究奠定了基础。