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目的:通过动物实验研究根动脉输注不同浓度左旋布比卡因对脊髓NSE(neuron-specific enolase神经元特异性烯醇化酶)、S100β蛋白、Tau蛋白的影响,初步探索神经内局麻药大概的毒性最低浓度及神经毒性机理。 方法:25只健康实验犬,随机分为5组,每组5只,对照组(S组:0.9%NaCL);不同浓度左旋布比卡因(levobupivacaine,LB)组(B组: B1:0.0625%/B2:0.125%/B3:0.25%/B4:0.375%左旋布比卡因),经肋间后动脉置管至椎间孔外口附近给药,各组缓慢注入3ml后(5min)用恒速泵经连接导管以3ml/h的速度持续泵注3小时。取相应部位的脊髓约1cm,10%缓冲福尔马林液固定,24小时后常规石蜡包埋,制成蜡块。做HE染色、尼氏染色(Nissl staining)、免疫组化,观察组织学变化、尼氏小体及尼氏染色阴性神经元细胞计数,观察NSE、S100β蛋白、Tau蛋白的表达并用图像分析仪测量其免疫阳性物的平均光密度值(MOD)。 结果:HE染色:当根动脉持续输注0.25%左旋布比卡因3小时后,相应部位脊髓组织中即可出现神经元空泡变性改变,且随浓度增加,神经元细胞内可出现核固缩改变。尼氏染色和免疫组化:与对照组比较:B2,B3,B4组尼氏染色阴性神经元细胞计数、NSE、S100β蛋白、Tau蛋白的表达(MOD:×10-2)增加,差异有统计学意义(5.52±0.81、14.69±0.67、15.23±0.91、15.93±0.60;8.6±1.50、17.63±0.82、16.98±1.13、17.01±0.38;12.2±1.58、18.50±0.83、19.64±1.09、19.10±0.83 VS0、12.64±0.27、12.82±0.21、12.78±0.46,P<0.01)。 结论:犬根动脉内持续输注0.125%左旋布比卡因3小时,即可引起脊髓神经元和神经胶质细胞的损伤。神经毒性的机理可能与Tau蛋白的过度表达有关。