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谷胱甘肽(GSH)是一种具有重要生理功能的活性三肽物质,具有防辐射、抗氧化、解毒、治疗眼科疾病等功能,被越来越多的应用于食品、化妆品、医药等领域,在我国有巨大的潜力和市场。但我国现在尚未实现谷胱甘肽的大规模生产,国内谷胱甘肽主要从日本等国家进口,致使价格居高不下,GSH的国产化刻不容缓。本项目主要针对GSH产量低和成本高的问题,基于菌种选育、发酵条件两个方面对微生物发酵生产谷胱甘肽进行深入的研究,为产业化提供一定的依据。从自然界中筛选出369株产谷胱甘肽菌株,再通过复筛得出6株GSH产量较高的菌株,经过稳定性测试选出一株产量高并且稳定性好的菌株PT-7(pt)作为出发菌株。采用紫外诱变、氯化锌、甲硫氨酸抗性物交替筛选获得突变株pt-32-3,该菌株GSH产量是出发菌株的150%,并且通过遗传稳定性实验验证其稳定性良好。经过形态观察及18SrDNA测序确定该菌株为假丝酵母属。通过单因素实验、响应面实验和正交试验对pt-32-3的培养基发酵条件进行了优化,确定了最佳的发酵培养基：葡萄糖4%,蛋白胨1.7%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸铵0.4%,硫酸镁0.14%,硫酸锌0.001%。确定了最佳培养条件为：初始pH5.0,接种量8%,发酵温度25℃,装液量40mL/250mL。发酵条件优化后GSH产量为167.84mg/L,并且GSH产量比优化前提高了39.49%,生物量增加了7.5%,胞内GSH含量也增加了30.25%。考察不同种类氨基酸对pt-32-3积累GSH的影响。通过验证实验比较了优化前后及加入前体氨基酸对GSH产量的影响,结果表明,发酵条件优化前后对GSH产量的影响非常显著,优化后再添加前体氨基酸后GSH平均产量为307.37mg/L,是优化前的3.55倍,是优化后未添加氨基酸的1.86倍；胞内GSH含量为23.07mg/g,是优化前的2.79倍,是未添加氨基酸的1.67倍。