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目的:文献报道长非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)表达水平变化及影响lnc RNA改变的因素与神经系统疾病发病相关。本项目研究长非编码RNAuc.48+小干扰RNA对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓(spinal cord,SC)中的降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)和嘌呤受体2X7(purinergic 2X7receptor,P2X7R)介导疼痛中的作用及可能机理,为糖尿病神经病理性疼痛防治提供实验基础和治疗靶点。方法:SD雄性大鼠高糖高脂喂养4周,两次小剂量腹腔注射链脲佐霉素(streptozotocin,STZ),3天后测得空腹血糖≥11.1mmol/L大鼠为2型糖尿病大鼠。连续测3周机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL),测得MWT、TWL值低于基础值的80%以下者为2型糖尿病神经病理性痛大鼠。利用随机分组法,将2型糖尿病神经病理性痛大鼠分为4组(n=36):(1)正常对照组(Control组),(2)糖尿病神经病理性痛+生理盐水组(DNP组),(3)糖尿病神经病理性痛+uc.48+小干扰RNA组(DNP+uc.48+si RNA组),(4)糖尿病神经病理性痛+uc.48+小干扰RNA阴性对照组(DNP+scramble si RNA组)。鞘内注射lnc RNAuc.48+小干扰RNA3天后,观察小干扰对DNP大鼠MWT和TWL阈值的影响,取腰椎L4-6段DRGs和SC,逆转录聚合酶链式反应法(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)和蛋白印迹(westen blot,WB)等方法观察DRG和SC中CGRP和P2X7R的表达变化,并用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定血清中白细胞介素-1β(interleukin,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平变化和WB方法观察DRG和SC中p38和ERK1/2通路磷酸化情况。结果:建模成功后DNP组大鼠的TWL、MWT与正常组相比较显著下降(P<0.01),uc.48+小干扰RNA组可以显著升高降低的MWT和TWL(P<0.01);RT-PCR、IHC和WB结果表明DNP组、DNP+scramble si RNA组与正常对照组相比,DRGs和SC中的lnc RNAuc.48+、CGRP、P2X7以及OX-42或GFAP的表达显著升高(P<0.01),而DNP+uc.48+si RNA组与DNP组相比显著下降(P<0.01)。DNP组大鼠DRGs和SC中p38和ERK1/2通路磷酸化程度和正常组相比较显著增高,uc.48+小干扰可以显著降低DNP大鼠DRGs和SC中p38和ERK1/2通路磷酸化程度。ELISA结果表明uc.48+小干扰可以显著降低DNP大鼠血清中升高的IL-1β和TNF-α水平(P<0.01)。结论:Lnc RNAuc.48+涉及到糖尿病神经病理痛大鼠疼痛传递,uc.48+小干扰RNA有可能通过降低DNP大鼠DRGs和SC中CGRP和P2X7的表达对DNP大鼠的痛觉过敏和痛觉异常有一定缓解作用。