PI4KA与乙型肝炎病毒复制的相关性研究

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目的:通过探讨PI4KA与慢性乙型肝炎患者病毒载量的关系;观察PI4KA在肝癌细胞株HepG2及HepG2.2.15中表达的差异,探究HBV对PI4KA表达的影响;在临床和细胞水平探讨PI4KA与乙型肝炎病毒复制的关系。方法:收集180例慢性乙型肝炎患者的血清,利用荧光定量PCR检测其HBV DNA的载量,根据其HBV DNA载量的高低,分为三组:高病毒载量组(HBV DNA>1×107拷贝/m1)、中病毒载量组(1×105拷贝/ml≤HBV DNA≤1×107拷贝/m1)及低病毒载量组(]3BV DNA<1×105拷贝/m1),同时以60名健康人作对照。采用ELISA法,检测各组外周血清中的PI4KA的含量;培养HepG2及HepG2.2.15细胞,当细胞融合达到90%时,提取两细胞RNA并逆转录成cDNA,采用实时荧光定量PCR法检测HepG2和HepG2.2.15细胞中PI4KA mRNA的表达水平;采用ELISA法检测此两种细胞培养上清液中PI4KA的表达水平。结果:60例健康人血清PI4KA的含量为2.29±0.75ng/ml;60例低病毒载量组血清PI4KA的含量为2.73±0.71ng/ml;60例中病毒载量组血清PI4KA的含量为3.52±0.78ng/ml及60例高病毒载量组血清PI4KA含量为4.72±0.77ng/ml。慢性乙型肝炎患者不同病毒载量组与健康对照组间血清PI4KA的含量差异有显著统计学意义(F=119.958,P<0.01),并且不同病毒载量组都显著高于对照组。随着HBV DNA载量的升高,PI4KA的含量增加,两者呈正相关(r=0.758, P<0.01); HepG2.2.15细胞中PI4KA mRNA的表达水平较HepG2高,差异有统计学意义(P<0.05);在细胞培养上清液中,HepG2和HepG2.2.15细胞PI4KA的含量分别为1.07±0.54ng/ml和1.63±0.43ng/ml, HepG2.2.15细胞中PI4KA的含量高于HepG2细胞(-2.29,P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎患者血清PI4KA的含量与HBV DNA载量密切相关;HBV能够在mRNA和蛋白水平上调肝癌细胞PI4KA的表达;在临床水平和细胞水平证实PI4KA与乙型肝炎病毒复制密切相关,乙型肝炎病毒可能通过上调宿主因子PI4KA的表达来促进自身病毒的复制。
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