金属配合物具有治疗糖尿病、癌症、阿尔兹海默症等疾病的潜力,受到广泛关注。早期研究金属药物的抗癌活性主要以DNA为靶点,随着蛋白质组学的发展,与重要疾病发生、发展密切相关的蛋白质作为靶标的金属药物研究越来越受到人们的重视。最近研究表明铜配合物可以通过抑制蛋白体的胰凝乳蛋白酶样活性、蛋白酪氨酸磷酸酶活性等抑制癌细胞生长,还能减少p淀粉样蛋白的生成具有治疗阿尔兹海默症的潜力。那么铜配合物到底能与体内多少种蛋白结合并影响生理作用呢?本论初步提取、纯化与鉴定了大鼠肝细胞中能与铜配合物结合的蛋白质,以及初步研究纯化蛋白质与不同结构铜配合物的结合作用,寻找铜配合物的蛋白质靶标。具体工作及成果如下：1.采用原位消化法、Percoll单密度梯度离心法及糖原染色法从大白鼠肝脏中提取并且纯化肝细胞,得到的肝细胞纯度达到95%以上。2.通过铜离子亲和层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳等初步提取鉴定大鼠肝脏细胞中97种能与铜配合物结合的蛋白质,及其蛋白质的种类、分子质量以及在样品中的含量。并且通过阴阳离子交换柱分离、纯化了其中3种蛋白质,即过氧化氢酶(Protein A)、待定蛋白(Protein B)和鸟氨酸氨甲酰基转移酶(Protein C)。3.通过荧光光谱初步研究了纯化蛋白质过氧化氢酶(Protein A)和另一种纯化蛋白质(Protein B)与13个不同结构的铜配合物的结合作用。实验结果显示：13个铜配合物对两种蛋白质的荧光猝灭是静态猝灭过程,其结合比是1：1,不同结构的铜配合物与纯化蛋白质的结合强度不同。