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目的: 目前,心脏死亡供者(Donor after Cardiac Death,DCD)已成为国际上公认的供者三大来源之一,其应用有逐年增加的趋势,并且临床效果已接连被多家国际权威医学机构所肯定。但是,DCD器官由于热缺血时间较长,在移植术后发生移植物功能障碍(也称早期移植物功能不良,initial poor function,IPF)和原发性无功能(primary nonfunction,PNF)的几率较高,因而器官的移植前保存和修复就成为DCD器官捐献工作中的重中之重。 机械灌注在器官移植的基础性研究中已不再是新兴话题,特别是在肾移植领域,已有接近30年的历史。但是这项研究却始终停留在基础研究层面,并没有广泛应用于临床。究其原因主要是受技术条件及设备工艺水平所限。近年来,随着器官移植需求量的增加,器官移植医生务必限制移植前移植物的丢失量并保证移植物的活力达到最大可利用率。并且新一代的灌注设备不断完善,机械灌注再次成为移植界热门话题。但在国内,胰腺的机械灌注还处于空白阶段。 目前器官保存液主要已UW液为主,但是其仅限于器官的冷保存,是否能在机械灌注中发挥其作用还有待研究。针对机械灌注对微循环要求的特点,如何使组织得到有效且充分的灌注,将是移植医生工作的重点。前列腺素E1是一种小分子多肽。其作用为扩张血管,增加器官血流量,降低血管外周阻力,降低血压。通过其扩张血管的特性,使胰腺微循环灌注充分正是我们拟达到的目的 方法: 利用杜洛克大白长白三元杂交猪DCD模型作为研究对象,利用机械灌注的方法,对比研究分析机械灌注后与单纯冷保存胰腺的病理学变化,反映其在胰腺保存中的作用;对比研究分析机械灌注不同时间后胰腺组织中其caspase-3的表达,反映不同时间的机械灌注对胰腺保存的作用;对比研究分析机械灌注不同时间后提取胰岛当量,纯度,活性及胰岛素释放指数的变化,反映不同时间的机械灌注对提取胰岛质量的作用;对比研究分析单纯UW液机械灌注组与UW液加前列腺素E1机械灌注组提取胰岛当量,纯度,活性及胰岛素释放指数的变化,反映前列腺素E1在机械灌注中对提取胰岛质量的作用。 结果: 单纯冷保存组病理学评分为4.2±0.84,机械灌注组病理学评分为8.4±1.14,P<0.05认为有统计学意义。随着机械灌注的进行,细胞凋亡逐步出现,并且出现血管壁细胞,外分泌腺体细胞及胰岛细胞依次凋亡的顺序。机械灌注后,提取胰岛的当量、纯度、活性及胰岛素释放指数明显增多,对比未灌注组提取胰岛的质量存在明显的统计学意义。并且在机械灌注180分钟时,胰岛的质量达到最佳。对比单纯UW液灌注组,UW液加前列腺素E1灌注组提取胰岛当量,纯度,活性及胰岛素释放指数明显增多,存在明显的统计学意义。 结论: 机械灌注可以有效清除胰腺血管内血栓形成,而且相对于单纯冷保存来说,相同时间保存后,机械灌注更能保持胰岛的完整性。机械灌注180分钟时胰腺既得到了充分的灌注又使胰岛细胞凋亡在最小范围内。胰岛提取的胰腺最佳机械灌注时间为180min。对比0min组,机械灌注180min可使胰岛提高产量24.1%,活性提高24.4%,胰岛素释放提高18.4%,有显著统计学意义。通过向UW液中加入前列腺素E1改良机械灌注液,可有效提高胰岛提取的效率,与单纯应用UW液灌注对比,增加胰岛产量22.3%,纯度11.2%,胰岛功能13.7%,有显著统计学意义。