适配子-PLGA纳米粒靶向超声/光声双模态造影剂的体外寻靶及显像的初步研究

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第一部分适配子-PLGA纳米粒靶向超声/光声双模态造影剂的制备及一般性质检测目的研制一种适配子偶联的包裹纳米金棒和液态氟碳的PLGA纳米粒,观察适配子与纳米粒的连接情况以及其光致相变的效果。方法采用双乳化法制备包裹纳米金棒及全氟己烷(PFH)的PLGA纳米粒(GNP);用碳二亚胺法将适配子与PLGA纳米粒连接获得“适配子-PLGA纳米粒”靶向相变造影剂(AP-GNP)。光镜、激光共聚焦显微镜及电镜下观察及检测AP-GNP基本性质;激光共聚焦显微镜下及流式细胞术观察及检测适配子与纳米粒连接情况;以激光仪辐照AP-GNP观察其光致相变情况。结果成功制备适配子修饰的包裹纳米金棒和液态氟碳的PLGA纳米粒,其平均粒径为(472.4±25.8)nm,适配子与纳米粒的连接率可达97.98%,激光辐照后,纳米粒光致相变效果明显。结论适配子与PLGA纳米粒成功连接,且该靶向相变纳米粒光致相变效果明显,从而使其能够成为良好的靶向超声/光声造影剂,为之后的体外/体内寻靶实验以及靶向超声/光声显像打下了良好的基础。第二部分适配子修饰的靶向超声/光声双模态造影剂的体外寻靶及显像的研究目的 研究适配子修饰的包裹纳米金棒和液态氟碳的靶向PLGA纳米粒体外寻靶能力,观察其介导超声/光声显像的现象。方法采用双乳化法制备PLGA纳米粒,用碳二亚胺法将MUC1适配子与PLGA纳米粒连接得到“适配子-PLGA纳米粒”靶向相变造影剂。以荧光显微镜检测其与其特异性识别的乳腺癌MCF-7细胞的体外靶向情况,并设置普通纳米粒组、适配子干扰组及HELA细胞组三个对照组。用光声仪来观察其介导的体外超声/光声信号增强的现象。结果靶向纳米粒在MCF-7细胞周围大量聚集并牢固结合,而非靶向纳米粒组、适配子干扰组及HELA细胞组均未见明显特异性结合。靶向纳米粒在光声仪激发后,超声信号与光声信号较激发前有明显增强。结论成功制备的靶向纳米粒对乳腺癌MCF-7细胞有良好的靶向性及特异性,其对超声/光声显像效果明显,具备成为超声/光声双模态靶向造影剂的各项特性,为后续的体内寻靶实验提供实验基础,有望成为良好的靶向诊断分子探针。
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