苹果乙烯响应转录因子MdEILs的克隆及其功能鉴定

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植物气体激素乙烯可以调控植物的生长、发育和对环境的响应。EIN3(ETHYLENE INSENSITIVE3)是植物乙烯信号途径中一个非常重要的转录因子,作用于EIN2的下游和ERF的上游。为了对苹果中的乙烯信号有更好的研究,本实验在苹果中克隆了EIN3的同源基因命名为MdEIL1(EIN3-like1)。并对其时空表达模式及其生物学功能等进行分析和鉴定。主要研究工作与结果如下。1.克隆了MdEIL1基因,ORF区全长为1980bp,编码含有659个氨基酸残基的多肽链。预测的等电点为4.99,蛋白的分子量为74.4kDa。2.半定量分析了MdEIL1及其3个同源基因的时空表达情况。发现这4个基因在果肉和果皮中均有表达,但是在根茎叶的表达具有特异性,在花中未检测到基因表达。同时发现,这些基因表达明显受ACC,、CTK、IAA诱导,但是Me-JA诱导不明显。3.通过对MdEIL1进行原核诱导表达,发现其蛋白大小与理论值相吻合,也进一步证明了克隆的准确性。4.异位表达MdEIL1基因可以提高转基因拟南芥的乙烯响应,通过调控下游基因的表达影响下胚轴的长度。在黑暗下通过提高MdEIL1的表达来抑制下胚轴伸长;在强光下通过提高AtPIF3的表达来促进下胚轴伸长。以上的数据表明参与乙烯信号转录途径同时提高了乙烯响应。
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