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一、两种方法检测肝癌患者外周血中CD4+CD25hi-intTreg水平的关系及意义目的：在已有的以标记CD4+CD25hi-intCD127low标记Treg的基础上,建立以CD4+CD25hi-intFoxp3+标记Treg的方法,并观察二者之间的相关性；初步探讨肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)患者外周血中Treg的水平；为进一步的研究奠定基础。方法：采用流式细胞术,分别用CD127low和Foxp3+两种标记方法检测31例HCC患者外周血的Treg水平,检测32例健康对照组CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg水平。结果：建立了稳定可靠的检测核转录因子Foxp3的方法,用Foxp3+和CD127low两种标记方法检测HCC患者外周血中Treg占CD4+T细胞分别为(10.33±4.47)%和(10.51±4.78)%,两者之间呈正相关,Pearson相关系数为0.889,P<0.01,相关有统计学意义。两者曲线拟合提示幂模型是最优模型,建立回归方程Y=1.236x(x0.899)(Y为Foxp3+ Treg,x为CD127lowTreg)。HCC患者与健康对照组外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+ Treg占CD4+T细胞的比例分别为(10.33±4.47)%和(7.34±1.76)%,P<0.01,差异有统计学意义。结论：在已有的以标记CD4+CD25hi-intCD127low标记Treg的基础上,建立了以Foxp3+标记Treg的方法,这种方法分群较好,结果稳定,且为Treg的特异性检测方法。两种检测方法所得Treg数值之间呈正相关,表明可用CD127进行Treg的临床检测,两者之间的数值转换可以通过幂模型。HCC患者外周血中Foxp3+Treg的水平升高。二、乙肝肝癌患者外周血调节性T细胞和免疫状态的分析目的：探讨乙肝肝癌患者外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg水平及其他免疫状态的变化。方法：流式细胞术检测46例乙肝肝癌患者、21例乙肝肝硬化患者及32例健康对照者外周血中CD4+CD25hi"intTreg水平,并同时流式细胞术检测这些乙肝肝癌和乙肝肝硬化患者外周血和7例健康对照中γδT细胞(CD3+CD4"CD8-)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒T细胞(CD3+CD4-CD8+)、总T细胞(CD3+CD19-)、自然杀伤T细胞(CD3+CD16+CD56+)、自然杀伤细胞(CD3"CD16+CD56+)、白细胞共同抗原(CD45+)、CD4+/CD8+T细胞比例表达率。结果：HCC组、LC组、对照组外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg占CD4+T细胞的比率分别为(9.21±2.07)%、(8.13±0.69)%和(7.34±1.76)%,P<0.05(P=0.00),差异有统计学意义。外周血免疫状态分析显示：NKT细胞在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(7.09±3.24)%、(7.56±4.70)%和(11.93±8.04)%；NK细胞在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(30.13±8.58)%、(10.46±8.06)%和(11.25±8.53)%；CD45+细胞在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(19.82±4.46)%、(10.65±4.59)%和(10.79±7.28)%；CD4+细胞在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(27.56±3.36)%、(35.06±7.72)%和(32.88±8.41)%；CD8+T细胞在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(25.01±8.47)%、(13.63±7.04)%和(20.19±9.94)％；CD4+/CD8+比例在对照组、LC组和HCC组的比例分别是(1.22±0.45)%、(2.98±1.23)%和(1.86±0.77)%；上述项目的方差分析提示差别有统计学意义,P<0.05。γδT细胞和总T细胞三组之间差别无统计学意义。结论：肝癌患者外周血Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比率明显升高。肝癌患者体内存在复杂的免疫紊乱：NKT细胞升高,CD45+T细胞和NK细胞的下降；以肝硬化患者为对照,肝癌患者外周血中CD4+T细胞水平没有变化,CD8+T细胞水平升高,而CD4+/CD8+比值降低；而以健康人为对照,肝癌患者外周血中CD4+T细胞水平升高,CD8+T细胞水平有降低趋势,但是没有统计学意义,而CD4+/CD8+比值升高,这与目前多数研究结果不同,为我们进一步研究提供了思路。