百蕊草创伤敷料的制备及性能评价

来源 :重庆理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lv53647678
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皮肤是人体最大的保护屏障,若在损伤后未得到合适的处理,伤口极易出现炎症、细菌感染,甚至二次损伤等情况,难以愈合。聚乙烯醇(PVA)是一种人工合成高分子聚合物,具有良好的生物相容性和理化性质;海藻酸钠(SA)是天然高分子化合物,具有优良的保湿性和吸水性。将聚乙烯醇和海藻酸钠经过冻融制备出的复合水凝胶不仅能为伤口提供湿润环境及覆盖保护作用,也能作为药物载体,实现药物的持续缓慢释放,解决传统敷料在伤口治疗中的不足,加速伤口愈合。天然植物中含有多种功能性有效成分,对改善伤口环境、促进愈合起着积极作用。具有“植物抗生素”美称的百蕊草含有黄酮、有机酸、多糖、生物碱等多种活性成分,具有抑菌、消炎镇痛、抗氧化、免疫调节等生物活性,目前在创伤中尚未见应用,因此本文使用PVA、SA、百蕊草提取物制备出了百蕊草复合水凝胶,并表征了水凝胶的各项性能,考察了百蕊草复合水凝胶对大鼠全层缺损皮肤的修复能力。以乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比为因素进行了单因素及响应面法实验,优化了百蕊草有效成分(以黄酮提取当量计)的提取工艺,再对百蕊草提取物的抗氧化性、细胞毒性、抑菌性、抗炎性进行检测,达到临床应用标准后以期用作载入敷料的药物。以PVA和SA为水凝胶基底材料,通过物理冻融法制备了PVA/SA水凝胶,对水凝胶的含水率、溶胀率、保湿率、给湿率、凝胶分数等物理性能进行考察,优化PVA/SA水凝胶的基底材料配比。加入百蕊草提取物后通过物理冻融法制备了百蕊草复合水凝胶,利用扫描电镜、红外光谱仪对水凝胶的形貌及结构进行分析,并对百蕊草复合水凝胶的力学性能、抗氧化性、抗炎性、细胞毒性、血液相容性进行综合评价。在不同p H的PBS缓冲液中检测了水凝胶24 h的药物释放率,以达到敷料的持续给药效果。通过构建大鼠背部全皮层切除模型,对背部皮肤组织的愈合情况及组织病理学进行观察,评价百蕊草复合水凝胶创伤修复能力。实验结果表明:在乙醇浓度为65%、料液比为1:40 g/m L、提取温度为65℃的条件下超声50 min,有效成分提取当量(以黄酮提取当量计)为28.2 mg/g;经萃取及层析纯化后的提取物在400μg/m L时能清除93.5±0.31%的DPPH自由基,对ABTS自由基的清除率为98.96±0.33%;10-12.5 mg/m L为提取物抑制对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长的最低抑菌浓度范围;在1mg/m L以下的药物浓度范围内无细胞毒性,能促进巨噬细胞生长,抑制LPS刺激巨噬细胞分泌NO,表现出良好的抗炎活性,说明提取物在1 mg/m L浓度范围内仍具有较好的生物活性,能为百蕊草活性成分的应用提供理论参考。通过物理冻融法制备的百蕊草复合水凝胶的合适材料配比是PVA含量为5 wt%,SA的含量为0.6 wt%,百蕊草提取物在凝胶中的终浓度为2 mg/m L。水凝胶内部分子间通过氢键连接,形成3D网状结构,海藻酸钠的添加改善了PVA水凝胶的保水性、溶胀性、给湿率,增加孔隙率,提高了拉伸强度等物理性能,百蕊草提取物的添加没有改变水凝胶的内部形态和结构。通过释药性实验发现复合水凝胶在p H为6.0、7.4、8.0的缓冲液中均可缓慢释放药物,24 h的释放率均大于50%,在p H为7.4的条件下释放率最大,24 h释放率为56.82±1.39%。百蕊草复合水凝胶的生物活性检测实验结果表明,百蕊草复合水凝胶能够抑制LPS诱导RAW264.7分泌NO,表现出良好的抗炎活性;对DPPH、ABTS自由基的清除率分别为78.6±0.67%、90.61±0.11%;能阻隔大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的渗透,降低细菌感染风险,具有良好的生物相容性。动物实验结果表明,与未经过处理的空白组相比,百蕊草复合水凝胶能够通过抑制促炎因子TNF-a、IL-6的分泌和提高抗炎因子IL-10的表达水平,降低炎症反应,增加胶原的生成和沉积,提高VEGF和b FGF的表达,促进血管生成,使用百蕊草复合水凝胶处理的大鼠在第20天时基本愈合,加速创面愈合。综上所述,百蕊草提取物具有良好的生物活性,且百蕊草复合水凝胶能覆盖伤口,提供覆盖保护和湿润作用,生物相容性良好,水凝胶的3D网络结构能有效释放药物,发挥百蕊草提取物的抗氧化性、抗炎性和抑菌作用,加速伤口愈合,为百蕊草在创伤修复中的应用奠定了理论基础。
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