脓肿分枝杆菌属于快速生长的非结核分枝杆菌,在国内的发病率较其他国家为高,且危害较大.脓肿分枝杆菌对一线抗结核药物—利福平(RFP)高度耐药,其耐药机制复杂,非单一原因所致,该文在对靶基因rpoB是否存在突变、靶蛋白的活性以及膜通透性等三个方面探讨其耐药的机制.第一部分:脓肿分枝杆菌的鉴定和对利福平的最低抑菌浓度的测定目的:对待研究的脓肿分枝杆菌进行鉴定,观察细菌对利福平的耐药程度.结论:1、用生化法进行NTM菌种鉴定有一定局限性,而PCR、RFLP法简单、迅速、准确,在实验室中用分子生物学方法进行菌种鉴定是必需的;2、脓肿分枝杆菌对RFP具很高的耐药性.第二部分:脓肿分枝杆菌rpoB基因突变集结部位的序列研究目的:研究脓肿分枝杆菌rpoB基因在突变集结部位是否存在突变而导致其耐药.结论:脓肿分枝杆菌对RFP的高耐药性并不是由于rpoB基因在这些部位的突变导致.第三部分:脓肿分枝杆菌RNA聚合酶的分离纯化和活性研究目的:分离纯化脓肿分枝杆菌RNA聚合酶,观察其在体外的传录功能以及对利福平的敏感性.结论:脓肿分枝杆菌对利福平的耐药并不是由于RNA聚合酶的变异所致.第四部分:了解脓肿分枝杆菌的膜通透性以及细胞内RFP的浓度,观察脓肿分枝杆菌细胞壁的超微结构.结论:脓肿分枝杆菌确实细胞壁的低通透性,耐药的脓肿分枝杆菌菌株细胞内RFP的浓度较敏感的分枝杆菌为低,且脓肿分枝杆菌耐药株和敏感株的细胞壁在结构上有一定差异,因此膜通透性低下可能是其耐RFP的重要原因.