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目的:采用颈背部皮下注射鱼藤酮法制备帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)模型,观察电针治疗对PD模型大鼠自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(Microtubule-associated protein 1 light chain3,LC3-Ⅱ)、P62表达的影响,探讨自噬在针刺防治PD中的作用。方法:选用SPF级健康雄性SD大鼠120只,体重(180±20)g,适应性喂养1周后可进行分组。8组分别是正常组,模型组,电针治疗7d组,假手术组,电针治疗14d组,电针治疗21d组,电针治疗28d组,电针预治疗组,每组15只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮法制备PD模型,给予鱼藤酮(2mg/kg,溶解于葵花油,浓度2mg/ml,充分混匀并避光保存)颈背部皮下注射,1次/d,连续28d。正常组不做任何处理;假手术组方法同模型组,但只注射不含有鱼藤酮的等量葵花油乳化剂(溶剂);电针预治疗组首先对正常的大鼠进行电针治疗7d,其后造模。4个电针治疗组模型建立结束之后,根据穴位太冲以及风府,进行电针治疗。选择使用0.5寸毫针进行针刺,接通G6805电针治疗仪,连续波,频率设为120次/分钟,每次治疗20min,每天1次,疗程分别为7d、14d、21d、28d。其中“风府”为每次固定使用,“太冲”隔天左右交替使用。(1)对各组大鼠进行行为学评分、运用敞箱实验检测各组大鼠水平运动以及垂直运动情况。(2)运用免疫组织化学染色法检测各组大鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)、α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)阳性表达。(3)运用RT-PCR法检测各组大鼠中脑黑质区LC3-Ⅱm RNA、P62m RNA表达的变化。(4)运用Western blot法检测各组大鼠中脑黑质区LC3-Ⅱ、P62蛋白表达的变化。结果:(1)评分结果示:与正常组及假手术组相比,模型组大鼠行为学评分明显升高(P<0.01);与模型组相比,各电针治疗组及电针预治疗组大鼠行为学评分显著降低(均P<0.01)。敞箱实验结果示:模型组的大鼠水平运动、垂直运动活性跟正常组以及假手术组比明显下降(P<0.01);各电针治疗组及电针预治疗组PD模型大鼠敞箱实验水平运动和垂直运动活性较模型组改善明显(均P<0.01)。(2)免疫组化检测结果示:与正常组及假手术组相比,模型组大鼠黑质内TH平均光密度值明显降低,α-syn平均光密度值明显增高(均P<0.01);与模型组相比,各电针治疗组及电针预治疗组大鼠黑质内TH平均光密度值显著升高,α-syn平均光密度值显著降低(均P<0.01);正常组及假手术组大鼠黑质内TH和α-syn平均光密度值无明显差异(P>0.05)。(3)RT-PCR检测结果示:与正常组及假手术组相比,模型组大鼠黑质内LC3-IIm RNA、P62m RNA表达显著升高(均P<0.01);与模型组相比,电针治疗28d组、电针治疗21d组、电针治疗14d组LC3-IIm RNA表达显著升高,P62m RNA表达则显著降低(均P<0.01),电针预治疗组和电针治疗7d组大鼠黑质内LC3-IIm RNA、P62m RNA表达与模型组相比未见明显差异(均P>0.05)。(4)Western blot检测结果示:与正常组及假手术组相比,模型组LC3-Ⅱ、P62蛋白表达均明显增加(均P<0.01)。与模型组相比,各电针治疗组及电针预治疗组LC3-Ⅱ蛋白表达水平增加明显,P62蛋白表达有显著下调(均P<0.01)。结论:自噬的激活及功能的正常运作能有效清除细胞内沉积的α-syn,延缓PD的进程。电针治疗可以改善自噬障碍,促使自噬流的正常运行,促进具有细胞毒性作用α-syn的降解,从而可对DA能神经元发挥着保护作用。