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目的:本研究通过建立Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,探究吉非替尼时辰给药的药动学特点,并从代谢酶、受体通路及时辰基因的角度探讨其可能的机制。方法:1.裸鼠皮下移植瘤模型的建立与随机分组:将Balb/c裸鼠置于严格的人工控制的12 h明期-12 h暗期(07:00开灯,19:00关灯)的条件下适应性饲养2周。于右上肢皮下接种HCC827细胞,建立裸鼠皮下移植瘤模型。将造模成功的裸鼠随机分为08:00、12:00、16:00、20:00、24:00及次日04:00六个时辰组。每个时辰组又随机分为给药组和模型组,并将模型组随机分为9个取血点组。另外,每个时辰点各随机加入未种瘤的正常裸鼠作为对照组。2.时辰给药及血浆、肝组织样本的获取:给药组裸鼠在相应时辰点给予1.0mg·kg-1吉非替尼混悬液,并于给药后0 h、15、30 min、1、3、5、7、9、16、24h摘眼球取血。将血液离心得到血浆并低温保存。取血后立即脱臼处死裸鼠,取肝组织冷冻保存。3.血药浓度检测:采用高效液相色谱法联合质谱(high-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)的方法检测各个时辰点吉非替尼的血药浓度,并用Win Nonlin 6.3计算各时辰点的药动学参数。4.相关基因表达水平的检测:采用实时荧光定量PCR(quantificational real time-polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测裸鼠肝组织中细胞色素P-450酶3a11(cytochrome P450 enzyme 3a11,cyp3a11)、cyp3a13、孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、组成型雄甾烷受体(constitutive androstane receptor,CAR)及相关时辰基因的表达。结果:1.8:00给药组吉非替尼的AUC(0-24h)明显高于其他给药组,清除率明显高于其他各组。对于MRT(0-24h),8:00、24:00、4:00给药组之间没有统计学差异,但均高于12:00、16:00、20:00给药组(P<0.05)。16:00、20:00给药组的AUC(0-24h)较低,其清除率较高(P<0.05)。2.各时辰点模型组的cyp3a11、cyp3a13、PXR、CAR、Per1、Per2和Bmal1 m RNA的表达具有昼夜节律性。cyp3a11、PXR和CAR m RNA在16:00到24:00之间表达较高,在20:00达到峰值,cyp3a13在16:00、20:00和24:00均有较高的表达(P<0.05)。Bmal1m RNA的表达在20:00时达到峰值,Per1、Per2在4:00表达较高(P<0.05)。给与吉非替尼后,20:00给药组cyp3a11、PXR、CAR m RNA 24 h的总体表达水平最高。12:00给药组cyp3a13 m RNA 24 h的总体表达水平最高。Bmal1 m RNA 24 h的总体表达水平在20:00给药组最高,这与代谢酶的表达趋势相吻合。Per1 m RNA 24 h的总体表达水平在24:00、4:00给药组较高,在20:00给药组最低。Per2 m RNA 24 h的总体表达水平在8:00、12:00、24:00给药组较高,这与代谢酶的表达相反,但与血药浓度的变化相吻合。结论:吉非替尼在荷瘤裸鼠体内的药动学过程因给药时间的不同而不同,具有明显的昼夜节律,表现为明早期和暗晚期(8:00、24:00、4:00)吉非替尼总体血药浓度较高。这可能与代谢酶(cyp3a11、cyp3a13)、核受体通路基因及相关时辰基因的时辰性表达有关。