天然水蛭素对大鼠背部随意皮瓣早期断蒂后成活的实验研究

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目的及意义探讨天然水蛭素对大鼠背部带蒂皮瓣早期断蒂后成活率的影响,为临床带蒂皮瓣早期断蒂奠定实验基础。方法选用40只健康成年的Wistar大鼠,雌雄不限,体重230g-290g;随机均分成实验组(A组)及对照组(B组),每组各20只。在两组大鼠背部设计9cm×3cm的带蒂皮瓣,实验组在距蒂部2cm、4cm、6cm、8cm处选择8个对称的注射点,每点注射0.5ml(3ATU)的天然水蛭素,对照组对应注射等量的生理盐水,每天注射一次至实验完成,术后4天断蒂。每天定时观察大鼠皮瓣成活情况,并于断蒂后一周测量皮瓣成活率。于皮瓣断蒂前1天及断蒂术后3、7天,取标本行组织学检查、免疫组织化学染色观察,测量微血管密度(microvascular density,MVD),取断蒂后7天的标本行荧光RT-PCR检测VEGF mRNA的表达量。结果:两组大鼠均成活至实验完成。断蒂术后实验组皮瓣成活面积均高于对照组,断蒂后7天,实验组皮瓣成活面积百分比为(81.819%±3.167%),显著高于对照组的(71.947%±2.262%)(t=8.022,P=0.000),统计学分析差异有统计学意义(P<0.05)。组织学观察显示,皮瓣断蒂前1天及断蒂术后3、7天,实验组毛细血管均明显多于对照组。免疫组织化学染色检测CD34结果示:两组均有CD34阳性细胞表达,且各时间点实验组CD34阳性细胞数均明显多于对照组,以此计算出的微血管密度结果也是如此;免疫组织化学染色检测VEGF的表达结果显示,两组均有VEGF阳性细胞,但断蒂前1天及断蒂后3、7天实验组VEGF阳性细胞数均明显多于对照组。断蒂术后7天,荧光定量RT-PCR检测VEGFmRNA的表达量结果示:实验组VEGFmRNA的表达量为7.055±0.681,对照组为5.609±1.604,两组比较有统计学意义(t=2.873,P=0.012)。结论:天然水蛭素可以通过提高大鼠皮瓣中CD34和VEGF的表达,促进大鼠背部带蒂皮瓣血管的生成,改善皮瓣血供,促进大鼠背部带蒂皮瓣早期断蒂并成活。
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