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为了检测氨苄青霉素在猪体内的残留,建立高效液相色谱法和毛细管电泳法两种检测方法,通过比较,选择高效液相色谱法来检测样品中氨苄青霉素残留。将血浆、肌肉、肝脏用三氯乙酸沉淀蛋白质后,用甲醛进行水浴衍生30分钟。用Agilent C18（4.6*250mm,Φ5μm）色谱柱条件下分离检测氨苄青霉素的衍生物,高效液相色谱荧光检测器激发波长346nm,发射波长422nm,流动相为磷酸二氢钾（PH 3.5）:乙腈（76:24,v/v）,流速为1mL/Min,进样量为100μL。得氨苄青霉素在血浆、组织中的最低检测限为0.01μg/mL,标准曲线的线性范围为0.01～10μg/mL。将氨苄青霉素以0.02、0.1、2和20μg/mL添加到血浆中,测得的回收率±标准误分别为:93.4±2.06%、93.5±3.81%、99.0±0.98%、93.3±1.06%,平均回收率为95.23±1.98%。将氨苄青霉素0.1、0.5、10、100μg/mL加入肌肉中,测得回收率±标准误为76.6±3.65%、77.7±2.96%、71.0±3.81%、72.3±3.60%,平均回收率74.40±3.50%;在肝脏中为75.6±2.18%、75.8±0.52%、76.0±2.40%、76.0±1.20%,平均回收率75.9±1.60%。将氨苄青霉素0.02、0.1、2、20μg/mL添加到血浆中,测得日内变异系数为0.10%、0.19%、0.08%、0.05%,平均日内变异系数为0.10±0.06%;日间变异系数为0.13%、0.20%、0.13%、0.10%,平均日间变异系数为0.14±0.04%。氨苄青霉素0.1、0.5、10、100μg/mL添加到肌肉中,测得日内变异系数为0.08%、0.06%、0.03%、0.02%,平均日内变异系数为0.04±0.03%;日间变异系数为0.12%、0.13%、0.13%、0.06%,平均日间变异系数为0.11±0.03%。在肝脏中日内变异系数为0.06%、0.08%、0.04%、0.03%,平均日内变异系数为0.05±0.02%;日问变异系数为0.22%、0.15%、0.09%、0.11%,平均日间变异系数为0.14±0.04%。实验证明,高效液相色谱法是一种灵敏、可靠的检测猪体内氨苄青霉素残留的分析方法。样品检测中,采用20mg/Kg的剂量一次给实验组肌肉注射,取2、4、6、12、24、48、72小时的样品,在高效液相色谱法的标准曲线线性范围内,血浆24小时检测不到血浆中含有氨苄青霉素,在12小时测得血浆中含氨苄青霉素为0.06μg/g;而在肌肉中,在48小时时测得体内的氨苄青霉素的含量为0.02μg/g,而在72小时则检测不出;肝脏中在72小时仍然可以检测出来,为0.016μg/g。