大部分的酶是具有催化功能的蛋白质,几乎所有的细胞活动过程都需要酶的参与。与其他非生物催化剂不同的是,酶的催化活性高、专一性强、反应条件温和等。但是酶容易受到多种环境因素的影响而失活,比如耐受性差,生产费用高等限制了其在工业及生活中的应用,模拟酶作为天然酶的替代者具有高效性却又有更宽泛的应用范围,因此受到科研工作者的广泛关注。本实验选择了六大酶类中的水解酶类作为模拟对象,以对硝基苯酚乙酸酯作为该模拟酶的催化底物,考察了不同的影响条件,得到了最优化的模拟酶。天然水解酶中一般含有直接参与催化过程的催化基团(催化三联体)和参与底物结合的连接基团。因此,本实验通过将肽(催化中心SHELKILKILKL和连接中心WLKILKLKL)与碳纳米管组装,得到了催化中心SHELKLKLKL和连接中心WLKLKLKL分别占67.7%和32.3%的最佳模拟酶CNT-(SHE/W)2:1-LKLKLKL。实验中发现当催化三联体朝向碳纳米管的表面时比朝向溶液时活性更高,表明碳纳米管不仅作为连接肽的平台,同时也创造了一个疏水微环境,促进质子转移过程,提高了催化活性。实验还发现二级结构对于模拟酶具有至关重要的作用。人工酶符合米氏方程行为,表明它模拟是的其对应的天然酶。综合研究考察多个方面后实验结果证明组合体CNT-(SHE/W)2:1-LKLKLKL对于催化底物对硝基苯酚乙酸酯水解具有最高的催化活性,其Km为1.66mM,Kcat/Km为 0.62 M-1S-1。此研究工作表明,设计的含有活性位点的短肽和碳纳米管的组合体能够有效的整体模拟天然酶的活性部位,能够作为模拟酶材料。本研究期望为人造模拟酶的研究提供一些指导和帮助。