【摘 要】
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仙鹤草（Agrimonia pilosa Ledeb.）为蔷薇科多年生草本植物龙芽草的干燥地上部分,具有收敛止血,截疟,止痢,解毒的功效,在民间亦被视为降血糖的良药。仙鹤草在治疗糖尿病以及降低患者血糖方面有着广泛的临床应用。文献报道仙鹤草中三萜类成分具有一定的降血糖活性,然而仙鹤草发挥降血糖作用的物质基础与作用机制尚不明确,有待进一步深入研究。因此,本文以仙鹤草为研究对象,以期发现具有降血糖活性的
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仙鹤草（Agrimonia pilosa Ledeb.）为蔷薇科多年生草本植物龙芽草的干燥地上部分,具有收敛止血,截疟,止痢,解毒的功效,在民间亦被视为降血糖的良药。仙鹤草在治疗糖尿病以及降低患者血糖方面有着广泛的临床应用。文献报道仙鹤草中三萜类成分具有一定的降血糖活性,然而仙鹤草发挥降血糖作用的物质基础与作用机制尚不明确,有待进一步深入研究。因此,本文以仙鹤草为研究对象,以期发现具有降血糖活性的化合物,阐明其作用机制。本文以仙鹤草60%乙醇提取物为研究对象,利用加热回流提取、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、硅胶柱层析法、反相柱层析法、半制备HPLC法、重结晶法等多种分离手段从仙鹤草60%乙醇提取物大孔树脂30%乙醇-水洗脱部分共分离纯化得到28个化合物。综合利用高分辨质谱、核磁共振波谱、紫外吸收光谱、红外吸收光谱、圆二色光谱等方法鉴定化合物的结构。其中化合物1、2、15为新化合物;化合物1-14为三萜类化合物;化合物15、16为间苯三酚衍生物类化合物;化合物17-22为有机酸类化合物;化合物23-28为其他类型化合物。进一步研究分离得到的三萜类化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,结果显示,化合物3-5具有显著的抑制α-葡萄糖苷酶的作用,半数抑制浓度（IC50）分别为18.9,23.3,27.1 μmol/L,均强于阳性药阿卡波糖（Acarbose）,化合物8-10也具有一定的抑制活性。α-葡萄糖苷酶抑制动力学实验结果表明,化合物3-5对α-葡萄糖苷酶的抑制作用均属于可逆性抑制,且抑制类型均属于反竞争性抑制。通过荧光猝灭、CD及分子对接实验进一步确证了化合物3-5与α-葡萄糖苷酶具有直接的相互作用,能导致酶的二级结构发生变化。胰十二指肠同源盒因子-1（PDX-1）在胰岛β细胞分化和维持成熟胰岛β细胞功能方面发挥着重要作用,本课题进一步研究仙鹤草主含成分仙鹤草内酯（化合物25）对PDX-1表达的影响,结果显示,化合物25在5 μmol/L浓度下对PDX-1的表达起到促进作用。本文初步揭示了仙鹤草降血糖活性的物质基础及其作用机制,为进一步合理开发利用仙鹤草药材提供了参考。
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