论文部分内容阅读
目的： 探讨氧化型低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoprotein，OxLDL）对树突状细胞（Dendritic cells，DC）功能的影响，为动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）的防治提供了提供新思路及理论基础。 方法： 1．采用免疫磁珠分选技术和流式细胞仪分选技术，分选C57BL/6（H-2Kb）小鼠脾脏、动脉壁CD11c+IA/IE+DC和MHCⅡ类分子限制的OVA323-339抗原肽特异的TCR转基因小鼠OT-Ⅱ小鼠（H-2Kb）的初始CD4+CD62L+T细胞。 2．采用 Real-time PCR技术，检测 DC CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、血红素氧合酶1（Heme oxygenase-1,HMOX-1）、Toll受体（Toll-like receptors,TLR）、内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、CD36和CD86基因的表达。 3．采用 DC与抗原肽特异性初始 CD4+CD62L+T细胞共培养技术和流式细胞仪技术，检测CD4+T细胞胞内IFN-γ和IL-17的产生，分析DC对T细胞分化的调控作用。 结果： 1. OxLDL促进小鼠脾脏DC、动脉壁DC CHOP和Caspase-3基因的表达，观察到 DC CHOP和Caspase-3基因的表达能被活性氧簇（Reactive oxygen species,ROS）的抑制剂N-乙酰半胱氨酸（N-Acetylcysteine，NAC）所抑制。 2.OxLDL促进小鼠脾脏 DC、动脉壁 DC HMOX-1基因的表达，且可以被ROS抑制剂NAC所抑制。 3. OxLDL能够诱导小鼠脾脏DC高表达CD36、CD86和eNOS基因，OxLDL也能促进DC表达TLR4，但不影响TLR2、TLR6、TLR7和TLR9的表达。 4．在DC与抗原肽特异性初始CD4+CD62L+T细胞共培养体系中，OxLDL能够促进小鼠脾脏DC诱导初始CD4+CD62L+T细胞向Th17细胞分化。 结论： 1. OxLDL通过ROS依赖的途径促进DC CHOP和Caspase-3基因的表达，同时OxLDL也可通过ROS依赖的途径促进DC HMOX-1基因的表达。 2. OxLDL能够诱导DC高表达CD36、TLR4、CD86和eNOS基因。OxLDL作用于DC能够诱导初始CD4+T细胞向Th17细胞分化。