前言 自体静脉移植被广泛应用于治疗动脉闭塞性疾病,但血管内膜增生及粥样硬化导致的再狭窄严重影响了远期疗效。研究表明,平滑肌细胞(SMC)过度增殖与移行是导致内膜增生的主要因素。而甲硫氨酸脑啡肽(M-Enk)对受损血管内膜的过度增殖有显著的抑制作用。我们通过建立大鼠自体静脉移植模型,应用M-Enk及其长效受体拮抗剂盐酸纳曲酮(NTX),观察M-Enk对内膜增殖的影响,并初步探讨了M-Enk在此过程中的作用机制。 方法 1.动物模型的建立 取三个月龄Wistar大鼠90只,体重250克左右,随机分成3组,每组30只,将颈静脉内侧分支间置端端移植于颈总动脉。手术后分别向3组每天腹腔内注射:第一组M-Enk(10mg/kg);第二组NTX(30mg/kg);第三组,生理盐水(0.2ml)做对照组。术后分别于1天,3天,1周,2周,4周取移植静脉。 2.指标检测 (1).形态学观察 取石蜡包埋标本切片,HE染色,Verhoeff弹力纤维染色,用计算机图像分析仪观测内膜增殖情况。 (2).c-fos、c-myc免疫组化染色 取石蜡标本切片,以兔抗c-fos多克隆抗体及兔抗c-myc多克隆抗体,分别行SABC法染色,阳性细胞核染色为棕黄色或棕褐色。计数阳性细胞所得数据用阳性率(%)表示。