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牛樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种珍贵的地方性台湾药用菌,近年来由于其抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗炎症和降血糖等作用而得到了越来越多的关注。本课题选用人工培养牛樟芝子实体作为研究对象,选用硅胶柱层析分离手段,结合薄层色谱(TLC)分析对牛樟芝子实体进行分离纯化,最终得到了19个化合物。并采用1H-NMR、13C-NMR和MS等波谱技术鉴定出15个化合物,分别为:醌Q3(quinone Q3,1),1,3-二甲氧基苯甲酸(1,3-dimethoxybenzoic acid,2),2,3,6-三甲氧基-5-甲基苯酚(2,3,6-trimethoxy-5-methylphenol,3),香草醛(vanillin,4),邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,5),没食子酸(gallic acid,6),2,3-二甲氧基-1,4-苯二酚(2,3-dimethoxy-1,4-benzenediol,7),β-胡萝卜素(β-carotene,8),antrodinA(9),熊果酸(ursolic acid,10),himanimidesA(11),D-山梨糖醇(D-sorbitol,12),尿嘧啶(uracil,13),(5S)-5-羟基-3-β-L-呋喃核糖基-2(5H)-呋喃酮((5)-5-hydroxy-3-β-L-ribofuranosyl-2(5H)-furanone,14),腺苷(adenosine,15)。其中化合物5、7、11～15为首次从牛樟芝中分离得到,化合物1、3和9为首次从牛樟芝子实体中分离得到。本课题采用了响应面法来优化牛樟芝的三萜类化合物的超声辅助提取工艺,并结合单因素实验确定了最佳提取工艺条件:乙醇浓度为85%,料液比为1:20,超声时间为80 min。最终经验证得到牛樟芝总三萜得率为2.1306%。接着对牛樟芝提取液及其不同萃取层进行抑菌活性研究,结果表明牛樟芝提取物和水部位对大肠杆菌的抗菌性最强,对枯草杆菌的抑菌效果最弱;石油醚层对大肠杆菌的抑菌性最强,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最弱。三个部位对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为:牛樟芝提取液:均为2 mg.mL-1;石油醚萃取层:2 mg·mL-1、2 mg·mL-1和4 mg.mL-1;水相:4 mg·mL-1、8 mg·mL-1和8 mg.mL-1。在上述分离的基础上,本课题采用高效液相色谱法(HPLC)对其中分离出的3种单体化合物antrodin A、himanimides A和quinone Q3进行了定量分析和方法学检验。色谱条件为:色谱柱:WondaCract ODS-2 C18;流动相:乙腈-5%甲醇水溶液(75:25);流速:1mL·min-1,柱温:30℃;进样量:20μL;检测波长:205 nm。方法学验证结果表明,仪器精密度良好;方法重现性高;牛樟芝子实体样品的稳定性良好。含量测定结果表明,antrodin A、himanimides A和quinone Q3在人工培养牛樟芝中的含量分别为0.3549 mg·g-1、0.1801 mg·g-1和1.1003 mg·g-1。