双低甘蓝型油菜杂交种亲本指纹图谱及其在杂种纯度鉴定中的应用

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该研究采用RAPD分子标记技术,对39份双低甘蓝型油菜杂交种亲本材料的指纹和1个杂交种纯度的鉴定进行了研究.主要结果为:1.140个随机引物对39份亲本材料进行RAPD扩增,选出40个能产生清晰多态性主带的引物重复扩增,确定其中9个能稳定扩增出清晰多态性主带的引物为DNA指纹图谱扩增引物.2.9个引物扩增出重复性好的多态性主带构建出39份亲本的DNA指纹图谱.亲本DNA指纹图谱可将27份材料--区分开,另外12份材料合并为4组,每组内的材料均为来源相同姊妹系,指纹图谱鉴定结果与材料实际来源相吻合.3.通过对一个杂交组合H9909两亲本的指纹图谱分析,初选出4个引物S1334,UBC523,S374和S1365用于杂种纯度的鉴定.引物S1334和UBC523在两亲本中均扩增出特异带引物S374和S1365能扩增父本特有的标记带.4.以两亲本和手工杂种F<,1>为模板对上述4个引物再一次进行RAPD扩增,S1334并没有在F<,1>的RAPD图谱产生理想的“双亲型”或“偏父型”带型,UBC523在F<,1>扩增得到的母本标记带和父本标记带大小相近,不易辨别;引物S374、S1365均能使F<,1>产生父本的特异带.进一步确定了引物S374和S1365可用于杂种鉴定.5.引物S374的RAPD标记将待鉴定100个单株中的5个不育株标记为假杂种,与田间育性调查的结果完全一致.引物S1365的RAPD分析结果显示,除上述5个不育单株外,另外两个可育单株亦为假杂种,可能由外来花粉串粉或机械混杂而引起.此外,该研究对引物的筛选、标记带的参照对象、双引物协同鉴定以及RAPD标记在生产中的应用等问题进行了讨论.
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