【摘 要】
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背景:近年来,microRNAs (miRNAs)对于癌症等疾病的诊断和预后作用越来越受到重视。目前常规检测miRNAs的方法均需要标记或扩增,步骤较复杂。而最新的硅纳米线传感器具有灵敏度
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背景:近年来,microRNAs (miRNAs)对于癌症等疾病的诊断和预后作用越来越受到重视。目前常规检测miRNAs的方法均需要标记或扩增,步骤较复杂。而最新的硅纳米线传感器具有灵敏度高、响应快等特点,在分子检测中具有一定优势。本研究致力于研发一种可快速、直接检测miRNAs的硅纳米线生物传感器。方法:硅纳米线芯片由多晶硅材料经光刻制备而成,经过2%(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷((3-Aminopropyl) triethoxysilane, APTES)和1.25%戊二醛化学修饰之后,将未标记的单链DNA (ssDNA)探针固定于生物传感器表面,根据分子杂交的原理,通过比较测试前后的电阻值差异,来检测miRNA标准品Let-7b和从人肝癌细胞HepG2提取的总RNA中snRNA U6。结果:该硅纳米线芯片检测miRNA标准品Let-7b时检测下限可达到1fM,并能在1nM样品浓度条件下区分与Let-7b完全匹配和不匹配的序列。将其用于检测HepG2总RNA中snRNA U6时,检测的样品浓度下限达到0.2μg/mL。结论:本研究显示硅纳米线芯片能够至少从1fM浓度中检测至miRNA标准品,并能够从0.2μg/mL肝癌细胞总RNA中检测到snRNA U6,在今后的研究中将改进实验设计以期获得更佳的实验结果。
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