研究目的:首先,把国际上最先进的分离技术用于人血白蛋白的规模化生产中,如压滤技术、层析技术、全自动控制在线清洗消毒系统、反应条件(温度、重量、流速、pH等)自动控制系统、全自动控制大型超滤系统、全自动控制病毒灭活系统、全自动分装系统。第二,工艺变更要解决的两个主要问题。一是压滤技术的应用必须与原离心技术的部分共用设施、生产参数等相互衔接,再融合层析技术,克服手工操作带来的高强度体力劳动,适于大规模生产,节能降耗,提高经济效益。二是该生产工艺必须获得中国食品药品监督管理局的批准,因属重大工艺变更。第三,把GMP的标准和精神贯穿于该成果的研究和产业化的始终,保证产品的安全性、有效性、稳定性、质量可控性。研究方法:首先研究确立工艺,通过对压滤分离技术和离心分离技术比较,选择了国际先进的压滤分离技术;通过整合压滤与连续流技术原理,合二为一,优势互补,形成了一个新的概念设计—人血白蛋白压滤技术;我们对比了层析工艺与压滤工艺,把层析工艺融合于产品纯化工艺中,以提高产品纯度,降低铝离子含量,降低PKA含量等。其次,应用工控计算机精确控制,使脱水剂与蛋白质瞬间接触,降低对蛋白质的损伤,保持蛋白质的生物学活性;全自动控制病毒灭活系统,选用铂电阻Pt100,温度控制精度在±0.2℃,确保产品的不被破坏。应用在线清洗系统,对反应罐进行在线清洗消毒,通过在线电导率检测,保证反应罐的清洁彻底。第三,参照《药品生产质量规范》(1998年修订)附录对洁净室(区)管理的要求;对生产过程验证的要求如空气净化系统、工艺用水系统、设备清洗等,我们重新进行了厂房布局、非标设备设计、计算机控制软件的设计。研究结果:通过人血白蛋白压滤工艺研究,我们确定了生产工艺的条件,如温度、pH、乙醇浓度、助滤剂用量、滤板用量。用于产业化生产后,产品质量提高,金属铝离子含量仅为《欧洲药典》限量的30%以下,居国际先进水平。推广用于静注人免疫球蛋白和特异性人免疫球蛋白的生产,各项检测项目均达到最新版《欧洲药典》标准,尤其在纯度、铝离子、热原、分子大小分布、PKA、多聚体、吸光度、抗A、抗B凝集素、乙肝抗体等项目标准远高于欧洲药典;实现了全自动在线检测和在线清洗及病毒灭活。2005年工艺变更获国家局批准,2006年5月18日通过GMP认证现场检查,2007年5月13～18日通过血液制品GMP跟踪检查。结论及意义:该技术在国内同类技术中居领先地位,与传统的离心分离法相比—该技术实现了生产过程技术参数的在线控制,创造性的应用计算机精确控制的定量、定比例地使脱水剂与蛋白质瞬间接触,形成连续流动式反应,与层析技术结合,提高产品质量,关键技术指标如纯度、铝离子,居国际先进水平。该技术目前还用于血液制品的多种组分的分离、纯化、精制,如人血白蛋白、人免疫球蛋白、凝血因子类等产品生产。