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中药泽泻以块茎入药,为历代本草著作所收载,其使用历史源远流长,具有利水渗湿、泄热、化浊降脂之功效。现代大量药理研究和临床复方运用表明泽泻兼具降低血糖和降低血脂功效,同时也有研究报道显示泽泻具有抗炎活性作用。本论文研究泽泻的降脂、降糖功效作用,再从体内外模型探讨泽泻的抗炎作用,并采用基因芯片技术,初探其潜在作用靶点。 首先评价泽泻水提物和总三萜的降糖效果。采用高脂饲料诱导的胰岛素抵抗小鼠模型,经泽泻水提物和总三萜药物干预2周和4周末,测定腹腔注射葡萄糖或丙酮酸后0、15、30、60、120min各组小鼠血糖值,绘制耐量曲线,评价各个时间点泽泻水提和三萜的降糖效果。葡萄糖耐量结果显示,泽泻水提物和三萜能显著降低腹腔注射葡萄糖后60min时间点的血糖水平,提示两者均能提高小鼠糖利用率。丙酮酸耐量结果显示,在给药4周末,泽泻水提物高剂量(3g/kg)能显著降低腹腔注射丙酮酸后2h内各个时间点血糖值,提示泽泻水提物能改善肝脏糖异生而达到降糖的效果。 其次评价泽泻水提物和总三萜的降脂效果。采用高脂饲料Ⅰ诱导的胰岛素抵抗并伴有高血脂小鼠为模型,研究泽泻降脂作用。再通过高脂饲料Ⅱ、高脂乳剂Ⅰ和高脂乳剂Ⅱ不同配方组成的3种饲料干预SD大鼠形成不同类型的高脂血症模型,主要以血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)为指标,血脂康为阳性药,再次验证泽泻的降脂效果。实验结果显示,泽泻总三萜能够显著降低高脂饲料Ⅰ干预的小鼠总胆固醇(TC),但对此模型的甘油三酯(TG)水提物和三萜各剂量均无改善作用。泽泻总三萜0.036g/kg及以上剂量有效降低高脂饲料Ⅱ和高脂乳剂Ⅰ诱导的轻度高脂血症大鼠血液中TC、TG和LDLC的水平。对于高脂乳剂Ⅱ诱导的高脂血症伴脂肪肝大鼠模型,泽泻总三萜在0.072g/kg及以上剂量有效降低TC、LDL-C的水平,并改善肝脏组织的脂肪肝变性程度。 再者评价泽泻水提物和总三萜的抗炎效果。选用小鼠小胶质细胞(BV-2)为模型对象,通过药物与脂多糖(LPS)同时干预BV-2细胞,采用酶联免疫试剂盒(ELISA)方法建立相关曲线并测定白细胞介素-6(IL-6)炎性因子的分泌量,从体外模型中研究泽泻水提和总三萜的抗炎效果。结果说明泽泻总三萜的能降低IL-6分泌量而起抗炎作用,而泽泻水提物无此作用。再进一步选用二甲苯致大鼠耳轮廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿、角叉菜胶致大鼠足肿胀的不同炎症模型,通过测量肿胀度并计算抑制率,验证泽泻的抗炎作用。结果显示,总三萜中(100μg/mL)、高(200μg/mL)剂量组均能显著降低BV-2细胞IL-6分泌量,且成剂量相关性。泽泻总三萜在0.216g/kg有效减轻小鼠耳廓肿胀,在0.072g/kg及以上剂量有效减轻大鼠棉球肉芽肿胀程度,但各研究剂量对角叉菜胶诱导的足肿胀无明显改善作用。综上,研究表明在泽泻三萜在体内外均具有一定抗炎效果。 综合以上研究结果,说明泽泻总三萜在降脂、降糖及抗炎方面均有不同程度改善效果,而泽泻水提物在降糖方面表现出良好的作用。基于泽泻总三萜多方面功效作用,论文最后采用芯片技术探讨泽泻降脂、降糖及抗炎多靶点作用机制。选取泽泻三萜组小鼠的肝脏组织进行检测,并将各给药组检测结果与模型组检测结果进行比对,结果表明总三萜组差异基因2854个。其中包括调控脂代谢的PPARα和调控糖代谢的PPARγ,提示泽泻是PPARs多重激动剂,可能存在能同时激活PPARα、PPARγ受体的物质。除此之外,还包括调控胆固醇代谢的CYP7A1和CYP8B1,调控炎症信号的IκB、NF-κB等,提示泽泻三萜的降脂、降糖、抗炎可能是通过多信号、多途径、多靶点发挥其药效机制。