【摘 要】
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目的肿瘤干细胞具有无限增殖和多向分化的能力,具有高致瘤性和抵抗放化疗的特点,是恶性肿瘤复发和转移的根源。卵巢癌的特点是易于产生耐药和复发,高度提示可能存在肿瘤干细
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目的肿瘤干细胞具有无限增殖和多向分化的能力,具有高致瘤性和抵抗放化疗的特点,是恶性肿瘤复发和转移的根源。卵巢癌的特点是易于产生耐药和复发,高度提示可能存在肿瘤干细胞。本研究采用无血清悬浮培养法,从人卵巢癌细胞系A2780中分离培养卵巢癌干细胞球体,并对其特性进行鉴定。方法将人卵巢癌细胞系A2780制成单细胞悬液,悬浮于特殊配制的无血清培养基(serum free medium, SFM)中获得肿瘤细胞微球体,流式细胞仪检测细胞表面标志物CD44和CD133的表达；Transwell小室侵袭实验检测肿瘤细胞微球体的体外侵袭能力；CCK-8检测微球体细胞的增殖能力,比较两种细胞的倍增时间；将肿瘤微球体置于含有血清的培养基中使其诱导分化,并观察其形态学的变化。结果人卵巢癌细胞系A2780可在SFM中存活、增殖,形成悬浮生长并稳定传代的肿瘤细胞微球体,与正常贴壁的肿瘤细胞相比,此微球体高表达干细胞标志CD44、CD133(P<0.05),具有更强的体外侵袭力(t=9.354,P<0.05),具有更强的增殖能力(t=13.682,P<0.05)和更短的倍增时间(t=3.773,P<0.05),此微球体还可以在血清环境下诱导分化为普通的卵巢癌细胞。结论用含有生长因子的SFM悬浮培养人卵巢癌细胞系A2780可获得卵巢癌细胞微球体,实验证实,此细胞球体中富集有肿瘤干细胞。
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