亲环素J的表达水平与结直肠癌临床特征及预后的相关性研究

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目的:结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是目前我国发病率较高的恶性肿瘤之一,它起病隐匿,早期症状无特异性,晚期的患者预后较差,死亡率逐渐上升,严重影响了我国居民的生命健康,所以结直肠癌的诊断与治疗仍需不断探索。亲环素J(Cyclophilin J,CYPJ)是亲环素家族中的一种,具有脯氨酸顺反式异构酶(peptidylprolyl cistrans isomeras,PPlase)活性,其在多种恶性肿瘤中呈现高表达,与恶性肿瘤的形成、发展密切相关。本研究检测亲环素J在结直肠癌组织中的表达水平,对CYPJ的RNA表达量与结肠癌患者的临床资料进行分析,以及分析对预后的影响。方法:收集青岛大学附属烟台毓璜顶医院2012年12月至2016年6月期间209例Ⅱ、Ⅲ期结肠癌患者的肿瘤组织标本,同时收集患者的临床资料和病理诊断,对209例患者进行随访总生存期。选取30例配对的结直肠癌组织标本(包括癌和癌旁组织,均来源于同一患者的同一次手术),应用免疫组化的方法检测CYPJ蛋白在癌组织及癌旁正常组织的表达水平;应用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测30对(同免疫组化的30对样本相同)癌组织与癌旁正常组织中CYPJ的RNA表达水平。取全部209例结直肠癌组织标本(仅癌组织),提取RNA并反转录成cDNA,应用qRT-PCR检测结肠癌组织中CYPJ的RNA表达水平。使用统计软件SPSS23.0对实验数据进行统计分析:1)应用c2检验分析亲环素J蛋白在结直肠癌组织与癌旁组织的表达量差异;2)应用独立样本t检验对209例癌组织的CYPJ的RNA表达量与患者临床病理特征进行统计学分析;3)对CYPJ的RNA表达水平与总生存期(OS)进行受试者工作特征曲线(Receiver Operating Curve,ROC)分析,209例结直肠癌患者分为CYPJ的RNA水平低表达组和高水平表达组;将患者的临床病理资料和CYPJ的表达水平进行单因素分析,应用Kaplan-Meier法绘制生存分析曲线;4)将单因素分析P值较小的变量再进行多因素COX回归分析,建立多因素COX回归模型,采用双侧t检验,P<0.05具有统计学意义。结果:1.免疫组化:结直肠癌组织中的CYPJ的蛋白表达明显高于癌旁正常组织,癌组织的阳性率83.3%(25/30),癌旁正常组织的阳性率33.3%(10/30),差异具有统计学意义(P<0.001)。2.qRT-PCR:结直肠癌组织中CYPJ的RNA表达水平(6.23±1.03)明显高于癌旁组织(4.24±0.75),差异具有统计学意义(P<0.001);在结直肠癌组织中CYPJ的RNA表达水平与有无淋巴结转移(t=-2.07,P=0.043)有关,而与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度无关(P>0.05)。3.单因素分析表明临床分期、淋巴结转移、肿瘤浸润深度、CYPJ的表达量与结直肠癌患者的预后相关,CYPJ的RNA水平高表达组结直肠癌患者的OS明显短于低表达组,差异具有统计学意义(56.4±3.4月vs 79.7±1.2月,P<0.001)。4、Cox回归分析结果表明:CYPJ的RNA水平高表达(HR:7.229,95%CI:3.689~14.166)和肿瘤浸润深度(HR:2.633,95%CI:1.363~5.085)可作为影响结直肠癌患者术后生存的独立危险因素。结论:1.在结直肠癌组织中的CYPJ蛋白及RNA水平都呈现高表达,说明CYPJ与结直肠癌的发生和发展密切相关;2.结直肠癌患者的CYPJ的RNA表达水平与淋巴结转移情况有关,提示CYPJ参与结直肠癌的进展及转移过程;3.CYPJ的RNA表达水平和肿瘤浸润深度可作为结直肠术后患者评估预后的重要指标。
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