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本论文采用荧光发射光谱、紫外光谱、同步荧光扫描等实验技术获取中药分子-BSA相互作用信号,利用不同方法综合分析得到中药小分子-BSA相互作用的如下一些定量和定性作用信息,论文共分为六部分:
第1章绪论部分简要介绍了国内外小分子与生物大分子相互作用的研究现状,介绍了蛋白质的结构、功能和性质;综述了小分子物质与蛋白质相互作用的研究方法与技术、研究内容,提出本论文研究意义及选题思路。
第2章研究了两面针总生物碱与BSA的相互作用。考察了温度、酸度、离子强度及一些共存金属离子对相互作用体系的影响,研究发现两面针总生物碱对BSA的猝灭作用是静态猝灭,二者作用力类型为静电力,Ca2+、Fe2+、Zn2+可阻碍或减缓药物与蛋白质的结合。结合实验结果探讨了两面针总生物碱的抗肿瘤机制。
第3章研究了黄酮小分子牡荆素(VT)与BSA之间的相互作用。发现VT对BSA的荧光猝灭为动态猝灭。利用双对数曲线得到了二者的结合常数及结合位点,二者间主要结合力为疏水作用力。利用非辐射能量转移机理求取了VT与血清蛋白色氨酸残基之间距离。并探讨了几种共存金属离子对VT与BSA相互作用的影响。
第4章研究了黄酮小分子山奈素(KF)与BSA之间的相互作用。对比研究Tachiya模型与Stern-Volmer方程两种不同数学模型对相互作用体系计算结果的影响,对比了两种方法求取的结合常数、结合位点数及结合距离,分析了两种方法各自的优势。并利用同步荧光光谱法研究了KF对血清蛋白构象的影响。
第5章研究了三种母核相同位置上功能团不同的黄酮小分子槲皮素(Que)、金丝桃苷(Hyp)及芦丁(Rut)与BSA之间的相互作用。探讨了黄酮分子相同位置上功能团的不同对相互作用体系结合常数、结合位点数、结合作用力及蛋白质构象的影响。发现黄酮母核C环3位上单糖苷的存在抑制了其药效的发挥,而单糖苷递增为双糖苷时这种抑制作用又有所减弱。
第6章研究了重金属离子Cd2+对黄酮小分子槲皮素(Que)、金丝桃苷(Hyp)及芦丁(Rut)与BSA之间的相互作用体系的影响,对比了有无Cd2+的情况下,药物与血清蛋白结合常数、结合位点数、作用力及蛋白质构象的变化,发现Cd2+与Hyp、Rut结合部位位于其糖苷集团上,Cd2+在药物与BSA分子之间起“离子架桥”作用直接参与了药物-BSA之间的结合,使二者更有利于扦插入蛋白质的疏水腔内部;而Que母核C环3位的羟基却不利于此“离子架桥”作用。“离子架桥”作用是Cd2+对黄酮小分子与BSA相互作用过程的主要参与机制。