中央杏仁核GLP-1受体信号通路的摄食调控研究

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目的:中央杏仁核是胰高血糖素样肽1(GLP-1)摄食调控重要作用位点之一,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路在摄食和能量代谢调控中发挥着重要生理作用。本研究拟通过荧光免疫组化染色、核团微量注射等方法,观察激活或阻断中央杏仁核内GLP-1信号通路对大鼠摄食影响及潜在机制。方法:选用成年健康雄性Wistar大鼠,体重280-320 g。采用荧光免疫组织化学染色,观察大鼠中央杏仁核中GLP-1受体的分布;采用脑核团置管及中央杏仁核微量注射GLP-1受体激动剂Ex4或GLP-1受体拮抗剂Ex9,观察GLP-1受体信号通路激活或阻断对大鼠摄食量、高脂饮食、高岭土摄入、以及蔗糖和玉米油摄入的影响。结果:(1)大鼠中央杏仁核和尾壳核分别注射6-羧基荧光素(FAM)标记的Ex4(GLP-1受体激动剂),3小时后中央杏仁核内,而不是尾壳核,可见有呈黄色荧光的FAM,结合荧光免疫组化神经元核(NeuN)染色,确认FAM位于中央杏仁核神经元内。提示,GLP-1受体在中央杏仁核内的表达具有位置特异性。(2)中央杏仁核微量注射GLP-1受体激动剂Ex4,大鼠0-20 h累计摄食量显著降低(P<0.05);中央杏仁核微量注射GLP-1受体拮抗剂Ex9,大鼠0-4 h和0-20 h摄食量显著增加(P<0.05)。提示,内源性GLP-1在大鼠摄食行为中可能发挥重要作用。(3)中央杏仁核微量注射Ex4,大鼠高岭土摄入量无显著变化(P>0.05);虽然平均每餐摄食量有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);大鼠进食次数也无显著改变(P>0.05)。提示,中央杏仁核中GLP-1受体信号通路的激活所引起的大鼠摄食量减少并不是因恶心导致的。(4)中央杏仁核微量注射Ex4,大鼠高脂饲料第9 h始摄入量显著降低(P<0.05),持续至第20 h;大鼠高脂饮食每餐摄入量(P<0.05)以及进食餐数(P<0.05)均显著降低;中央杏仁核微量注射Ex9,大鼠0-2 h、0-4 h、0-6 h以及0-7 h高脂饮食摄食量显著增多(P<0.05)。提示,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路兴奋可增强大鼠饱食感(每餐摄入量减少)或饱足感(进食餐数减少)。(5)中央杏仁核微量注射Ex9,大鼠0-1 h、0-1.5 h和0-2 h蔗糖(P<0.05)或玉米油(P<0.05)摄入量均显著增高,大鼠0-24h蔗糖摄取总卡路里也显著增加(P<0.05),但大鼠对玉米油0-24h总卡路里摄入无明显影响(P>0.05)。提示,GLP-1受体信号通路的激活可能参与大鼠饮食偏好调控。结论:中央杏仁核内有GLP-1受体表达,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路参与大鼠摄食行为调控,且该信号通路的激活也对大鼠饮食偏好产生影响。中央杏仁核也是调控生理性摄食的重要位点之一。
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